【PromoCell】HWP诱导分化为Mature adipocytes及维持方法

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HWP 细胞产品人原代细胞 Human Primary cells 脂肪细胞系统 Adipose Cell System Promocell Mature adipocytes Preadipocyte Differentiation Medium Basal Medium Adipocyte Nutrition Medium Adipocyte Basal Medium

小白求助前辈指路

人前体脂肪细胞培养不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

人前体脂肪细胞

（HPA）

脂肪细胞在能量储存和代谢中起着重要作用。脂肪细胞分化是一个对代谢稳态和营养信号传导至关重要的发育过程，受到基因表达和信号转导等复杂作用的调控。脂肪组织中的前脂肪细胞在成年期始终存在，并且可增殖和分化为成熟的脂肪细胞，从而增加脂肪组织的质量。体外研究表明，不同组织来源的前脂肪细胞在脂质积累、脂肪生成转录因子表达和TNFα诱导的凋亡方面存在差异。脂肪细胞分化与众多生理和病理过程密切相关，包括脂肪代谢、肥胖、糖尿病、高脂血症和乳腺癌。HPA分离自内脏脂肪或皮下脂肪组织，其CD44和CD90免疫荧光染色呈阳性，且分化后脂质染色呈阳性。

培养方式

Preadipocyte Medium (PAM, Cat. #7211)用于体外培养HPA-v。Preadipocyte Differentiation Medium (PADM, Cat. #7221)用于将前体脂肪细胞体外分化为成熟的脂肪细胞，随后使用Adipocyte Medium (AdM, Cat. #7201)来维持分化后的成熟脂肪细胞。

HWP的诱导分化为

Mature adipocytes

HWP分化为Mature adipocytes的过程：

1) 将细胞在Preadipocyte Growth Medium培养至100%密度。

2) 将Preadipocyte Growth Medium更换为Preadipocyte Differentiation Medium（serum free）完全培养基，继续培养72小时。

3) 将培养基更换为Adipocyte Nutrition Medium 完全培养基，以完成分化过程。每2-3天用新鲜的Adipocyte Nutrition Medium继续培养细胞。经过12-14天的分化过程，脂肪细胞将分化为成熟脂肪细胞。

表1 HWP诱导分化培养材料

表2 Mature adipocytes培养材料

参考文献

[1] Tominaga K, Johmura Y, Nishizuka M, Imagawa M. (2004) “Fad24, a mammalian homolog of Noc3p, is a positive regulator in adipocyte differentiation.” J Cell Sci. 117(Pt 25):6217-26.

[2] Reue K, Glueck SB. (2001) “Accumulating evidence for differences during preadipocyte development: Focus on differential gene expression in white and brown preadipocytes.” Physiol Genomics. 7(1):1-2.

[3] Tchkonia T, Tchoukalova YD, Giorgadze N, Pirtskhalava T, Karagiannides I, Forse RA, Koo A, Stevenson M, Chinnappan D, Cartwright A, Jensen MD, Kirkland JL. (2005) “Abundance of Two Human Preadipocyte Subtypes with Distinct Capacities for Replication, Adipogenesis, and Apoptosis Varies among Fat Depots.” Am J Physiol Endocrinol Metab.

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