【Serumwerk】Lymphoprep™ Tube产品使用说明
产品信息
1. 组成
泛影葡胺钠 9.1 % (w/v) ，多糖5.7 % (w/v)
2. 理化特性
密度：1.077 ± 0.001g/ml
渗透压：290 ± 15 mOsm
内毒素水平：< 1.0 IU/ml
3. 稳定性和存储
保持无菌和防止光照条件下，Lymphoprep ™ Tube 可稳定保存3年。
产品介绍
单核细胞(单核细胞和淋巴细胞）的浮力密度低于红细胞和多形核细胞（PMN）白细胞（粒细胞）。绝大多数单个核细胞的密度低于1.077 g/ml。因此，这些细胞可以在密度为1.077 g/ml的等渗培养基上离心分离，从而使红细胞和PMN通过培养基沉淀，同时将单个核细胞保留在样品/培养基界面上。
Lymphoprep ™ 管是一种无菌管，其中Lymphoprep ™ 包含在一个塑料过滤盘下面。这使得稀释的血液可以简单地直接倒入管中，圆盘防止与分离介质混合。
分离程序
1. 将血液收集到含有抗凝剂（EDTA、肝素、ACD）的试管中或使用去纤维血液。
2. 在正常情况下，Lymphoprep™仍然保持在塑料插入物的下面。如果操作不当，可能会导致插入件的顶部出现一些泄漏。在这种情况下，在400 x g下离心1分钟，将液体移到管底。加入等体积的0.9% NaCI，稀释血液。
3. 将6 ml稀释血液（1：1）自由加入含有2 ml Lymphoprep™的试管中，或20 - 30 ml稀释血液（1：1）加入含有10 ml Lymphoprep™的试管中。
4. 在室温下，在旋转转子中（约20℃）下以800 x g离心20分钟。如果血液储存时间超过2小时，则将离心时间增加到30分钟。
5. 离心后，单个核细胞在样品/介质界面上形成一条明显的条带，如图所示。最好使用巴斯德移液管将这些细胞从界面上移除。或者，可以通过倒析去除塑料插入物上方的全部内容物。
6. 用0.9% NaCI或培养基稀释收获的部分，降低溶液密度，以250 x g离心10分钟使细胞成球。
红细胞单核悬液中的污染通常占细胞总数的3-10%之间。在强烈的免疫抑制治疗中，一些未成熟的粒细胞可能跟随淋巴细胞。当使用肝素化的血液时，必须去除大部分的血小板，以避免在细胞毒性试验中受到抑制。所描述的洗涤程序通常是足够的。
应用
Lymphoprep ™ 管可用于制备纯淋巴细胞悬液，用于组织分型、抗淋巴细胞血清和免疫学研究。
产品规格
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