【Serumwerk】胃黏膜肠嗜铬细胞样(ECL)细胞分离
胃黏膜肠嗜铬细胞样细胞分离不成功、实验做不出来怎么办?新手小白迫切求助,希望各位前辈在文章下方留言,分享自己的经验,为小白们答疑解惑!
胃黏膜肠嗜铬细胞样(ECL)细胞分离
NycodenzⓇ的方法相当不同:大多数方法使用两层梯度,其中ECL带在这两个梯度之间的界面上,而不是在样本下面的界面上。同样,13.8%和10.4% (w/v) NycodenzⓇECL细胞在两种NycodenzⓇ溶液的界面处条带。通常进一步降低较轻溶液的浓度:约9.2%或7% (w/v) NycodenzⓇ。ECL细胞通过10.4%的NycodenzⓇ溶液沉淀,其密度约为1.058 g/ml,仅略低于细胞漂浮在其上的10.8%碘克沙醇溶液。
Nycodenz® 产品信息
理化特性
●分子量:821 g/mol
●密度:2.1 g/ml
●溶于水浓度:80% (w/v),溶于水密度:1.426 g/ml
稳定性和储存
●固体形式的Nycodenz®在室温和避光条件下可稳定保存2年。
产品特点
●非离子型,对细胞无毒,代谢惰性
●可用于细胞、亚细胞细胞器和膜、大分子和病毒的分离
●形成真正的溶剂。因此,分离后很容易从细胞中除去培养基
●能抵抗细菌降解
●溶液可以进行高压灭菌
使用方法
1. 通过离心在原位形成的(自形成渐变)。
2. 将所需浓度的溶液分层放入适当的离心管和允许的解决方案扩散。使用Nycodenz®等渗溶液梯度可以在45分钟内简单地准备好。
3. 冷冻和解冻。
4. 梯度混合器。
应用
Nycodenz®可用于核酸、蛋白质、多糖和核蛋白的分离。此外,在等渗或轻度高渗条件下,大多数类型的亚细胞器都可以在Nycodenz®的梯度上成功分离。Nycodenz®渗透压低,无毒,是分离完整活细胞的理想介质。Nycodenz®的低粘度及其非离子特性已经证明了Nycodenz®在病毒和细菌的分离和纯化方面是有用的。
可分离:
哺乳动物和非哺乳动物的细胞
亚细胞的细胞器
非哺乳动物来源的细胞器
亚细胞的膜
蛋白质和蛋白质复合物
核糖核蛋白
病毒
Nycodenz®可以通过透析、超滤或凝胶过滤从样品中去除。细胞、亚细胞细胞器和其他颗粒物质可以通过离心从Nycodenz®中分离出来,而不会有被Nycodenz®污染的风险。
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