【Serumwerk】肝非实质细胞（Liver non-parenchymal cells)分离

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Serumwerk Bernburg AG 18003 Nycodenz®

小白求助前辈指路

肝非实质细胞分离不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

肝非实质细胞（Liver non-parenchymal cells)分离

常用NycodenzⓇ密度势垒约为15.7%、16%和16.75%;离心条件从600- 1700 g变化为15-20分钟。在混合器中28-30% NycodenzⓇ已添加到细胞悬液中，将其调整为15.8%，16.7%或17.5%;离心条件一般为1500-1700 g, 15-20 min。

NycodenzⓇ原液选项:配制不含NaCl的溶液A。将50ml的这个在150毫升烧杯上加热的磁搅拌器设置在大约。50℃并以少量添加28.7 g NycodenzⓇ粉末直至溶解。使溶液冷却到室温，然后用溶液A (- NaCl)配制最多100 ml。必要时进行过滤消毒。用溶液A(完全)稀释，产生与策略A或B中描述的碘克沙醇溶液浓度相同的溶液。

Nycodenz® 产品信息

理化特性

●分子量：821 g/mol

●密度：2.1 g/ml

●溶于水浓度：80% (w/v)，溶于水密度：1.426 g/ml

稳定性和储存

●固体形式的Nycodenz®在室温和避光条件下可稳定保存2年。

产品特点

●非离子型，对细胞无毒，代谢惰性

●可用于细胞、亚细胞细胞器和膜、大分子和病毒的分离

●形成真正的溶剂。因此，分离后很容易从细胞中除去培养基

●能抵抗细菌降解

●溶液可以进行高压灭菌

使用方法

1. 通过离心在原位形成的(自形成渐变)。

2. 将所需浓度的溶液分层放入适当的离心管和允许的解决方案扩散。使用Nycodenz®等渗溶液梯度可以在45分钟内简单地准备好。

3. 冷冻和解冻。

4. 梯度混合器。

应用

Nycodenz®可用于核酸、蛋白质、多糖和核蛋白的分离。此外，在等渗或轻度高渗条件下，大多数类型的亚细胞器都可以在Nycodenz®的梯度上成功分离。Nycodenz®渗透压低，无毒，是分离完整活细胞的理想介质。Nycodenz®的低粘度及其非离子特性已经证明了Nycodenz®在病毒和细菌的分离和纯化方面是有用的。

可分离：

哺乳动物和非哺乳动物的细胞

亚细胞的细胞器

非哺乳动物来源的细胞器

亚细胞的膜

蛋白质和蛋白质复合物

核糖核蛋白

病毒

Nycodenz®可以通过透析、超滤或凝胶过滤从样品中去除。细胞、亚细胞细胞器和其他颗粒物质可以通过离心从Nycodenz®中分离出来，而不会有被Nycodenz®污染的风险。

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