【Serumwerk】网柄菌属（The epistasis genus）和利什曼原虫（leishmania）分离
【Serumwerk】网柄菌属（The epistasis genus）和利什曼原虫（leishmania）分离
网柄菌属和利什曼原虫分离不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！
酸化菌体吞噬体（含军团菌）（Acifying bacterial phagosome (including Legionella)）分离
网柄菌属（The epistasis genus）
通过抗体结合去除溶酶体的核后上清液，通过5-30% (w/v)碘克沙醇100,000g离心2h。吞噬体呈带状。在斜坡的三分之一处。密集的含军团菌空泡部分重叠于线粒体;有趣的是，通过在匀浆中加入碘苯基硝基苯四氮唑(INT)来增加线粒体的密度，这一问题得到了解决。碘克沙醇梯度也被用于分析酰基CoA结合蛋白(AcbA)， AcbA以原生动物的突变形式异常地游离到致密囊泡群中。
利什曼原虫（leishmania）分离
亚细胞膜
将低速上清液加载到不连续的18.5%、28%和40% (w/v)碘克沙醇梯度上，在Beckman SW41转子中以约190,000 g离心90 min。梯度法分析atp酶的分布情况;在具有不同模式的许多组分中检测到。然而，这种酶分布模式在PGPHA转染的细胞中发生了改变。
糖体
利什曼原虫糖体的替代方法是使用密度屏障。在26,000 g下经50 min产生含粗糖体的部分(而不是步骤7中所述的条件);将其2 ml经10 ml 30% (w/v) Nycodenz®分层并在105,000 g下离心50 min以使糖体颗粒化。
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