【Serumwerk】囊泡性口炎病毒（VSV）（Vesicular Stomatitis Virus）纯化
【Serumwerk】囊泡性口炎病毒（VSV）（Vesicular Stomatitis Virus）纯化
囊泡性口炎病毒（VSV）纯化不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！
密度分离
VSV(囊泡病毒)已在碘克沙醇梯度中纯化，使用与上述狂犬病病毒大致相似的方法，尽管离心条件有很大不同。除用于悬浮病毒的溶液含有100mm NaCl、0.5 mM EDTA和50mm Tris-HCl, pH值为7.4外，其余连续梯度溶液的制备方法与上述相同。梯度溶液中也含有相同浓度的这些组分。在Beckman SW41旋翼管中制备10 ml连续梯度(15-35% (w/v)碘克沙醇)，并将粗制病毒悬液分层置于其顶部。方案有两个主要差异;将梯度在160,000 g下离心1.5 h，然后通过简单地以28,000 g浓度颗粒化90 min来获得初始病毒浓度。除此之外，方案本质上与上述非常相似，病毒在梯度中间条带。
Cuevas等描述了一个5-50% (w/v)的碘克沙醇梯度，在160,000 g离心1.5小时用于纯化VSV-mCherry, VSV-GFP和VSV-A3853C。
沉降速度分离
通过20% (w/v)蔗糖屏障沉降浓缩后，将颗粒重新悬浮在HEPES缓冲盐水中过夜，并在连续的7.5-27.5% (w/v)碘克沙醇梯度上分层。将梯度离心85,000 gav 25-30分钟。尚未给出在这些条件下病毒带的位置。
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