【Serumwerk】非灵长类动物血液分离单核细胞（Hyaline leukocyte）

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Serumwerk Bernburg AG

Serumwerk Bernburg AG 1893 OptiPrep™

小白求助前辈指路

非灵长类动物血液分离单核细胞不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

密度梯度法

溶液制备

A. OptiPrep™（使用前轻轻摇动）

B. 10倍浓缩磷酸盐缓冲盐水（10xPBS）。

C. 多糖溶液：6%（w/v）多聚蔗糖400（MWt 400,000）的水。

试验方法

1．将溶液A、B和C按以下体积比：16.7：8.3：75混合，制备密度屏障。

2．在离心管层中，2体积的肝素化血液超过1体积的密度屏障。

3．600 g离心20 min，允许转子不制动而减速。弃去液面上的PBMC。

4．用两体积的缓冲盐水稀释收集到的材料，并将细胞在250-500 g下颗粒化5-10 min。

方法注释

Sittelar等人指定使用肝素化的血液，并使用未稀释的血液。人的血液通常在应用于密度屏障前，用等量的生理盐水稀释。从其他出版物中还不完全清楚采用了哪种战略。使用任何一种能提供最佳结果的方法。

混合器法

溶液制备

OptiPrep™（使用前轻轻摇动）缓冲盐水

试验方法

将10 ml血液与1.25ml OptiPrep™通过几次温和的反转混合，如图2所示进行。

方法注释

Guo等人研究了该方法得出结论，这里描述的混合策略给出了一致的产量，高于任何已建立的替代程序。

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发布日期：2024-02-22 10:04:25
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