【Serumwerk】肺组织内皮细胞和上皮细胞(Endothelial and Epithelial cells)分离

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Serumwerk Bernburg AG

Serumwerk Bernburg AG 1893 OptiPrep™

所需溶液制备

A. OptiPrep™（使用前轻轻摇动瓶子）

B. 培养基，如RPMI-1640或DMEM

C. 含1%（w/v）胶原酶II的溶液B

D. 含10%胎牛血清的溶液B

试验方案

1．将解剖后的肺组织用剪刀剪成1 mm3的小块

2．在10 ml C溶液中37℃孵育2-3小时。

3．加入等体积的溶液D，将细胞悬液以600 g离心20 min。

4．将细胞颗粒重新悬浮于5 ml D溶液中。

5．将0.5 ml OptiPrep™与4.5 ml细胞悬液混合以使最终密度为1.04 g/ml。

6．将3 ml溶液D和2.5 ml OptiPrep™混合，制成密度为1.15 g/ml的溶液。

7．使用Gradient Master™从5 ml细胞悬液(1.04 g/ml)和5mL 1.15 g/ml溶液制备连续梯度。

8．在600 g离心20分钟后，使用注射器和金属套管从梯度中获取带状材料。

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Serumwerk Bernburg AG 1893 OptiPrep™
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发布日期：2024-02-20 13:48:23
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