【ATCC】人小气道上皮细胞（HPSAEpiC）培养基的配制

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人原代细胞 Human Primary cells 肺细胞系统 Pulmonary Cell System ATCC 人小气道上皮细胞 Small Airway Epithelial Cells Airway Epithelial Cell Basal Medium PCS-300-030

小白求助前辈指路

人小气道上皮细胞培养不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

人小气道上皮细胞

（HPSAEpiC）

气道上皮细胞在气道中形成连续的衬里，作为对外界有害因素的保护性物理和功能屏障，发挥着独特的作用。小气道上皮细胞（SAEpiC)通过趋化因子的产生和黏附分子的表达参与宿主防御，从而调节免疫反应，并产生有助于肺液体平衡的液体。许多气道疾病，如哮喘、毛细支气管炎、慢性阻塞性肺疾病、囊性纤维化等，都涉及气道表面上皮的损伤。HPSAEpiC的培养研究可有助于确定预防气道疾病的新的治疗方案。HPSAEpiC分离自人肺组织，其cytokeratin-18和cytokeratin-19的特异性抗体免疫荧光染色呈阳性。

完全培养基的配制

1)从冰箱中取出生长试剂盒（暂时储存温度为-20℃，长期保存温度为-80℃），确保所有组分的盖子都是紧闭的。

2)在将生长试剂盒的组分加入基础培养基之前，将其解冻。需要将L-谷氨酰胺组分在37°C的水浴中加热，并摇动以充分混匀，再加入至基础培养基中。

3)取出一瓶Airway Epithelial Cell Basal Medium（485 mL，2-8℃储存）。

4)使用70%乙醇喷雾剂对生长试剂盒组分瓶和基础培养基瓶的外部表面进行消毒。

5)层流罩或生物安全柜中无菌操作，使用单独的无菌移液管将每个生长试剂盒组分转移到基础培养基瓶中，并充分混匀，避免气泡产生，2-8℃避光保存（可稳定储存30天）。

6)抗菌剂和酚红不是必需的，但如果需要的话可以添加。建议将可选组分（GA溶液或PSA溶液）的体积加入完全生长培养基中，具体建议如下。

①庆大霉素-两性霉素B溶液（Gentamicin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：庆大霉素：10 µg/mL，两性霉素B：0.25 µg/mL）。

②青霉素-链霉素-两性霉素B溶液（Penicillin-Streptomycin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：青霉素：10 Units/mL，链霉素：10 µg/mL，两性霉素B：25 ng/mL）。③酚红（Phenol Red），0.5 mL（最终浓度：33 µM）。

表1 HPSAEpiC培养材料