【ATCC】人肺动脉内皮细胞（HPAEC）培养基的配制

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人原代细胞 Human Primary cells 肺细胞系统 Pulmonary Cell System ATCC 人肺动脉内皮细胞 Pulmonary Artery Endothelial Cells Vascular Cell Basal Medium PCS-100-030

小白求助前辈指路

人肺动脉内皮细胞培养不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

人肺动脉内皮细胞

（HPAEC）

肺动脉携带脱氧的血液从心脏输送到肺脏。与其他血管内皮细胞类似，肺动脉内皮细胞（PAEC）通过产生凝血和纤溶的激活剂和抑制剂来调节凝血和纤溶过程。此外，肺动脉内皮细胞（PAEC）产生的介质会影响血小板的粘附和聚集。PAEC通过合成和处理血管活性分子来控制血管张力，并与间充质细胞相互作用，来调节炎症事件。PAEC的这些功能与急性肺损伤、肺动脉高压、水肿、栓塞、肺动脉瘤和慢性阻塞性肺疾病有关。HPAEC的vWF/Factor VIII和CD31 (PECAM)特异性抗体免疫荧光染色呈阳性。

培养方式

无论是否添加人重组VEGF，均在低血清条件下培养主动脉内皮细胞。

完全培养基的配制

1)从冰箱中取出生长试剂盒（暂时储存温度为-20℃，长期保存温度为-80℃），确保所有组分的盖子都是紧闭的。

2)在将生长试剂盒的组分加入基础培养基之前，将其解冻。需要将L-谷氨酰胺组分在37°C的水浴中加热，并摇动以充分混匀，随后再加入至基础培养基中。

3)取出一瓶Vascular Cell Basal Medium （475 mL，2-8℃储存）。

4)使用70%乙醇喷雾剂对生长试剂盒组分瓶和基础培养基瓶的外部表面进行消毒。

5)层流罩或生物安全柜中无菌操作，使用单独的无菌移液管将每个生长试剂盒组分转移到基础培养基瓶中，并充分混匀，避免气泡产生，2-8℃避光保存（可稳定储存30天）。

6)抗菌剂和酚红不是必需的，但如果需要的话可以添加。建议将可选组分（GA溶液或PSA溶液）的体积加入完全生长培养基中，具体建议如下。

①庆大霉素-两性霉素B溶液（Gentamicin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：庆大霉素：10 µg/mL，两性霉素B：0.25 µg/mL）。

②青霉素-链霉素-两性霉素B溶液（Penicillin-Streptomycin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：青霉素：10 Units/mL，链霉素：10 µg/mL，两性霉素B：25 ng/mL）。酚红（Phenol Red），0.5 mL（最终浓度：33 µM）。

表1 HPAEC培养材料