【ATCC】人肾皮质上皮细胞（HRCEpiC）培养基的配制

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ATCC 人原代细胞 Human Primary cells 肾脏细胞系统 Renal Cell System 人肾皮质上皮细胞 Renal Cortical Epithelial Cells Renal Epithelial Cell Basal Medium PCS-400-030

小白求助前辈指路

人肾皮质上皮细胞培养不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

人肾皮质上皮细胞

（HRCEpiC）

肾小管上皮细胞（REpiC）在肾脏功能中发挥着至关重要的作用，表现出极化的形态，重吸收肾小球滤液中几乎所有的葡萄糖和氨基酸，同时允许其他没有营养价值的物质在尿液中排泄。人REpiC具有内化细菌的能力。为了研究REpi C与多种肾脏疾病的关系，HRCEpiC是一个有用的体外模型。HRCEpiC的cytokeratin-18和cytokeratin-19特异性抗体免疫荧光染色呈阳性。

完全培养基的配制

1)从冰箱中取出生长试剂盒（暂时储存温度为-20℃，长期保存温度为-80℃），确保所有组分的盖子都是紧闭的。

2)在将生长试剂盒的组分加入基础培养基之前，将其解冻。需要将L-谷氨酰胺组分在37°C的水浴中加热，并摇动以充分混匀，再加入至基础培养基中。

3)取出一瓶Renal Epithelial Cell Basal Medium（485 mL，2-8℃储存）。

4)使用70%乙醇喷雾剂对生长试剂盒组分瓶和基础培养基瓶的外部表面进行消毒。

5)层流罩或生物安全柜中无菌操作，使用单独的无菌移液管将每个生长试剂盒组分转移到基础培养基瓶中，并充分混匀，避免气泡产生，2-8℃避光保存（可稳定储存30天）。

6)抗菌剂和酚红不是必需的，但如果需要的话可以添加。建议将可选组分（GA溶液或PSA溶液）的体积加入完全生长培养基中，具体建议如下。

①庆大霉素-两性霉素B溶液（Gentamicin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：庆大霉素：10 µg/mL，两性霉素B：0.25 µg/mL）。

②青霉素-链霉素-两性霉素B溶液（Penicillin-Streptomycin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：青霉素：10 Units/mL，链霉素：10 µg/mL，两性霉素B：25 ng/mL）。

③酚红（Phenol Red），0.5 mL（最终浓度：33 µM）。

表1 HRCEpiC培养材料