【ATCC】人冠状动脉内皮细胞（HCAEC）培养基的配制

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人原代细胞 Human Primary cells 心脏细胞系统 Cardiac Cell System ATCC 人冠状动脉内皮细胞 Coronary Artery Endothelial Cells Vascular Cell Basal Medium PCS-100-030

小白求助前辈指路

人冠状动脉内皮细胞培养不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

人冠状动脉内皮细胞

（HCAEC）

冠状动脉为心脏提供了大量的血液供应，以满足其持续的收缩活动所需的巨大能量需求。冠状动脉内皮细胞（CAEC）位于血管壁内，不断受到血流剪切应力的作用，诱导细胞形态发生该变并产生调节血管收缩和血管生长的内皮源性物质。CAEC可调节细胞粘附分子的表达，以控制和微调炎症反应和纤溶作用。这些生理特性使得CAEC培养在研究内皮功能障碍机制、冠心病和动脉粥样硬化的发病机制以及新型疾病治疗的发展中得到广泛应用。HCAEC的vWF/Factor VIII和CD31 (PECAM1)特异性抗体免疫荧光染色呈阳性。

完全培养基的配制

1)从冰箱中取出生长试剂盒（暂时储存温度为-20℃，长期保存温度为-80℃），确保所有组分的盖子都是紧闭的。

2)在将生长试剂盒的组分加入基础培养基之前，将其解冻。需要将L-谷氨酰胺组分在37°C的水浴中加热，并摇动以充分混匀，随后再加入至基础培养基中。

3)取出一瓶Vascular Cell Basal Medium （475 mL，2-8℃储存）。

4)使用70%乙醇喷雾剂对生长试剂盒组分瓶和基础培养基瓶的外部表面进行消毒。

5)层流罩或生物安全柜中无菌操作，使用单独的无菌移液管将每个生长试剂盒组分转移到基础培养基瓶中，并充分混匀，避免气泡产生，2-8℃避光保存（可稳定储存30天）。

6)抗菌剂和酚红不是必需的，但如果需要的话可以添加。建议将可选组分（GA溶液或PSA溶液）的体积加入完全生长培养基中，具体建议如下。

①庆大霉素-两性霉素B溶液（Gentamicin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：庆大霉素：10 µg/mL，两性霉素B：0.25 µg/mL）。

②青霉素-链霉素-两性霉素B溶液（Penicillin-Streptomycin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：青霉素：10 Units/mL，链霉素：10 µg/mL，两性霉素B：25 ng/mL）。

③酚红（Phenol Red），0.5 mL（最终浓度：33 µM）。

表 1 HCAEC培养材料