【ScienCell】人寡突胶质细胞前体细胞（HOPC）产品使用攻略

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人寡突胶质细胞前体细胞 HOPC 人原代细胞 Human Primary cells 人神经细胞系统 Nervous Cell System Sciencell Oligodendrocyte Precursor Cells Oligodendrocyte Precursor Cell Medium

小白求助前辈指路

人寡突胶质细胞前体细胞培养不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

人寡突胶质细胞前体细胞

（ HOPC）

1993年，Raff、Miller和Noble首次发现了寡突胶质细胞的前体细胞，并进行了广泛的研究。文献中将这些前体细胞称为寡突胶质细胞-2型星形细胞祖细胞或寡突胶质细胞前体细胞（OPC）。发育中和成年的中枢神经系统都含有OPC。中枢神经系统的髓鞘形成细胞——寡突胶质细胞是由OPC发育而来的。在培养条件下，OPC可以从神经前体细胞或神经干细胞中产生，在碱性成纤维细胞生长因子的作用下，可通过血小板源性生长因子或星形细胞产生的因子的存在进行增殖，并分化为成熟的寡突胶质细胞。基于这些特性，OPC为研究发育转变提供了一个良好的细胞群体。HOPC的A2B5和O4特异性抗体免疫荧光染色呈阳性。

培养方式

在解冻HOPC细胞之前，应组织好实验，解冻后尽快用于实验。由于HOPC于细胞无法增殖，因此无法进行传代。

培养瓶：PLL包被的培养瓶。

培养基：HOPC用提供的OPCM完全培养基（含基础培养基、1% OPCGS和1% P/S）培养。若对其进行分化则用提供的Oligodendrocyte Precursor Cell Differentiation Medium完全培养基（包含基础培养基、1% FBS、1% OPCDS和1% P/S）。

操作步骤：

1) 包被多聚-L-赖氨酸（2 μg/cm²）培养瓶（T-25培养瓶）的准备：将5 mL无菌水加入到T-25培养瓶中，加入5 μL PLL原液，轻轻吹匀后将培养瓶放置在37°C的孵育箱中过夜（或至少1小时）。

2) 无菌水清洗包被PLL的T-25 2次，加入10 mL完全培养基，将解冻后的HOPC加入至包被的T-25中（推荐种植密度为20,000-25,000 cells/cm²），十字交叉法轻柔摇晃培养瓶使细胞分布均匀，将培养瓶放入细胞培养箱中。（注：不建议在解冻后稀释和离心细胞，因为这些操作对细胞的伤害比培养中残留的二甲基亚砜（DMSO）的影响更大。同时，将细胞置于PLL涂层培养有助于促进细胞附着。）

换液：为了获得最佳结果，在培养开始后至少16小时内不要干扰培养。第二天更换培养基，以去除残留的二甲基亚砜和未附着的细胞，之后每隔三天更换一次培养基。

生长条件：在CO₂浓度为5%，温度为37℃，相对湿度（RH）为95%的细胞培养箱中培养

表1 HOPC培养材料

参考文献

[1] Raff MC, Miller RH, Noble M. (1983) “A glial progenitor cell that develops in vitro into an astrocyte or an oligodendrocyte depending on the culture medium.” Nature. 303: 390-6.

[2] ffrench-Constant C, Raff MC. (1986) “Proliferating bipotential glial progenitor cells in adult rat optic nerve.”Nature. 319: 499-502.

[3] Wolswijk G, Noble M. (1989) “Identification of an adult-specific glial progenitor cell.” Development. 105: 387-400.

[4] Noble M, Murray K, Stroobant P, Waterfield MD, Riddle P. (1988) “Platelet-derived growth factor promotes division and motility and inhibits premature differentiation of the oligodendrocyte/type-2 astrocyte progenitor cells.”Nature. 333: 560-2.

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