【PromoCell】胎盘人周细胞（hPC-PL）产品使用攻略
胎盘人周细胞培养不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！
胎盘人周细胞
（hPC-PL）
Human Pericytes from Placenta（# C-12980）分离自人胎盘组织，细胞标志物CD31、CD34、CD105和CD146特异性抗体免疫荧光呈阳性。
培养方式
培养基：用提供的Pericyte Growth Medium（Serum-free）（完全培养基包含Basal Medium和其他补充剂）培养。
操作步骤
1) 完全培养基的配制：将补充剂室温融化后加入至Basal Medium混匀，避光保存于4℃条件下（完全培养基4℃-8℃条件下可储存6周）。
2) T-25中加入10 mL Pericyte Growth Medium完全培养基。细胞播种前，在37°C和5% CO2培养箱中预平衡至少30 min。将解冻后的细胞转移到预热的完全培养基中，并置于细胞培养箱中培养。
换液：在培养开始后至少16小时内不要干扰培养。第二天更换培养基，以去除残留的二甲基亚砜和未附着的细胞，之后每隔三天更换一次培养基，直到培养达到约70%的密度。
传代：当细胞密度达>70%时进行传代。
1) 将Accutase-Solution、HBSS和培养基提前置于室温平衡（不建议37℃加热）。
2) 弃除旧培养基，并用HBSS清洗细胞后吸除，加入2.5 mL Accutase-Solution溶液。室温下4-5 min以分离细胞，用显微镜检查细胞。当超过90%的细胞开始脱落时，轻轻敲击容器的侧面以松动剩余的细胞，小心地吸取细胞悬浮液并转移到15 mL离心管中。以220×g的速度离心细胞5 min。弃掉上清液，加入1 mL完全培养基，并通过小心地上下吸移来重悬细胞。按3,000~4,000 cells/cm2接种密度将细胞分装到预先预热至37°C的含完全培养基的培养瓶（1 ml/5 cm2的量添加培养基），或根据实验设计安排种植密度，并放入培养箱中培养，每两到三天更换培养基。
生长条件
在CO2浓度为5%，温度为37℃，相对湿度（RH）为95%的细胞培养箱中培养。
表 1 hPC-PL培养材料
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