【ATCC】人主动脉平滑肌细胞（HASMC）培养基的配制

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人原代细胞 Human Primary cells 心脏细胞系统 Cardiac Cell System ATCC 人主动脉平滑肌细胞 Aortic Smooth Muscle Cells Vascular Cell Basal Medium PCS-100-030

小白求助前辈指路

人主动脉平滑肌细胞培养不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

人主动脉平滑肌细胞

（HASMC）

研究表明，SMC表达钙通道、ICAM-1和VCAM-1；ICAM-1和VCAM-1的表达可能导致血管壁的炎症反应，并在血管疾病的进展中起促进作用。体外培养的血管SMC在血管疾病研究中发挥重要作用，并可用于鉴定治疗动脉疾病的新靶点。HASMC分离自人主动脉，其α-smooth muscle actin（αSMA）的特异性抗体免疫荧光染色呈阳性。

完全培养基的配制

1)从冰箱中取出生长试剂盒（暂时储存温度为-20℃，长期保存温度为-80℃），确保所有组分的盖子都是紧闭的。

2)在将生长试剂盒的组分加入基础培养基之前，将其解冻。需要将L-谷氨酰胺组分在37°C的水浴中加热，并摇动以充分混匀，随后再加入至基础培养基中。

3)取出一瓶Vascular Cell Basal Medium （475 mL，2-8℃储存）。

4)使用70%乙醇喷雾剂对生长试剂盒组分瓶和基础培养基瓶的外部表面进行消毒。

5)层流罩或生物安全柜中无菌操作，使用单独的无菌移液管将每个生长试剂盒组分转移到基础培养基瓶中，并充分混匀，避免气泡产生，2-8℃避光保存（可稳定储存30天）。

6)抗菌剂和酚红不是必需的，但如果需要的话可以添加。建议将可选组分（GA溶液或PSA溶液）的体积加入完全生长培养基中，具体建议如下。

①庆大霉素-两性霉素B溶液（Gentamicin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：庆大霉素：10 µg/mL，两性霉素B：0.25 µg/mL）。

②青霉素-链霉素-两性霉素B溶液（Penicillin-Streptomycin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：青霉素：10 Units/mL，链霉素：10 µg/mL，两性霉素B：25 ng/mL）。

③酚红（Phenol Red），0.5 mL（最终浓度：33 µM）。

表 1 HASMC培养材料