【ATCC】人脐带来源间充质干细胞完全培养基的配制

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人脐带来源间充质干细胞人原代细胞 Human Primary cells 人脐带细胞系统 Human Umbilical Cord Cell System ATCC Mesenchymal Stem Cell Basal Medium PCS-500-030

小白求助前辈指路

人脐带来源间充质干细胞培养不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

人脐带来源间充质干细胞

人类脐带来源的间充质干细胞（Human Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stem Cells）在间充质干细胞基础培养基中添加脐带来源间充质干细胞生长试剂盒的低血清成分后，提供了一个理想的细胞系统来在低血清（2% FBS）条件下扩增间充质干细胞。在最佳生长条件下维持的人类脐带来源的间充质干细胞具有多能性，能够分化为脂肪、骨骼和软骨细胞等不同细胞系。

完全培养基的配制

1)从冰箱中取出生长试剂盒Mesenchymal Stem Cell Growth Kit-Low Serum (ATCC PCS-500-040)暂时储存温度为-20℃，长期保存温度为-80℃），确保所有组分的盖子都是紧闭的。在将生长试剂盒的组分加入基础培养基之前，将其解冻。需要将L-谷氨酰胺组分在37°C的水浴中加热，并摇动以充分混匀。

2)取出一瓶Mesenchymal Stem Cell Basal Medium（485 mL，2-8℃储存）。

3)使用70%乙醇喷雾剂对生长试剂盒组分瓶和基础培养基瓶的外部表面进行消毒。

4)层流罩或生物安全柜中无菌操作，使用单独的无菌移液管将每个生长试剂盒组分转移到基础培养基瓶中，并充分混匀，避免气泡产生，2-8℃避光保存（可稳定储存30天）。

5)抗菌剂和酚红不是必需的，但如果需要的话可以添加。建议将可选组分（GA溶液或PSA溶液）的体积加入完全生长培养基中，具体建议如下。

①庆大霉素-两性霉素B溶液（Gentamicin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：庆大霉素：10 µg/mL，两性霉素B：0.25 µg/mL）。

②青霉素-链霉素-两性霉素B溶液（Penicillin-Streptomycin-Amphotericin B Solution），0.5 mL（最终浓度：青霉素：10 Units/mL，链霉素：10 µg/mL，两性霉素B：25 ng/mL）。

③酚红（Phenol Red），0.5 mL（最终浓度：33 µM）。

表 1 Human Umbilical cord-derived

Mesenchymal Stem Cells培养材料