【ScienCell】人肝细胞（HH）产品使用攻略

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人肝细胞 HH 人原代细胞 Human Primary cells 人肝脏细胞系统 Hepatic Cell System Human Hepatocytes Sciencell Hepatocyte Medium

小白求助前辈指路

人肝细胞培养不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

人肝细胞

（HH）

肝脏有许多重要功能，包括能量代谢、异物生物转化、血浆蛋白合成以及物质解毒。人类肝细胞（HH）是多功能细胞，能够进行蛋白质合成及存储、合成胆固醇并产生和分泌胆汁以及解毒物质。培养HH是研究肝脏功能、代谢和肝脏疾病的优良体外模型。了解肝脏的分子机制可有助于阐明治疗肝脏疾病的新疗法。HH可使用cytokeratin-18 和/或和albumin的特异性抗体进行免疫荧光染色标记。

培养方式

HH细胞不能进行细胞传代，因为肝细胞在培养中不会增殖，在解冻细胞之前，应该安排好实验，尽快将HH用于实验。

培养板：PLL（多聚-L-赖氨酸）包被培养板。

培养基：HH在提供的HM完全培养基（含5%FBS，1% hepatocyte growth supplement(HGS)，1% P/S）中培养。

操作步骤：

1) 包被PLL（2 μg/cm²）涂层的6孔细胞培养板的准备：向6孔板的一个孔中加入2mL无菌水，然后加入20 μL聚-L-赖氨酸原液，轻柔混匀；对其他孔重复此步骤。将培养板放置在37℃的孵育箱中过夜（或至少一小时）。

2) 无菌水清洗PLL涂层培养板两次。将解冻后的细胞用完全培养基轻柔重悬后，均匀分布在6孔板的每个孔中（推荐密度为2 x 10⁴ cells/cm²），每孔3 mL完全培养基，置于细胞培养箱中培养。

换液：培养开始后至少16小时内不要干扰培养。第二天更换培养基，以去除残留的二甲基亚砜和未附着的细胞，及时将细胞用于实验。

生长条件：在CO₂浓度为5%，温度为37℃，相对湿度（RH）为95%的细胞培养箱中培养。

表 1 HH 培养材料