【Serumwerk】副黏病毒科（Paramyxoviridae）纯化
副黏病毒科纯化不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！
麻疹病毒（Measles virus）纯化
试验方法
Hallek等纯化的麻疹病毒，在Vero细胞中生长;在细胞溶解后，将含病毒的液体以1,500 g澄清10 min，上清液应用于6-36% (w/v)碘克沙醇连续梯度，200,000 g离心2h。
Brindley和Plemper还在Vero细胞中培养病毒，在100 mM NaCl、1 mM EDTA、10 mM Tris-HCl中溶解细胞后，在5000 g下澄清裂解产物，在4℃下保持20 min，以使细胞核和细胞碎片颗粒化。在裂解缓冲液中制备10%和30% (w/v)碘克沙醇的两种溶液并用于制备不连续梯度。在将裂解产物装入顶部后，以100,000 g离心90 min。以最小液体量从界面收获浓缩病毒，然后以连续的10%-30% (w/v)碘克沙醇梯度加载，并以100,000 g离心14 h。所有操作均在4℃下进行。梯度以等体积分数收集并分析。
Liljeroos等人也使用不连续梯度来浓缩病毒。Iodixanol解决方案准备使用三羟甲基氨基甲烷缓冲液180毫米氯化钠(EDTA)和病毒沉淀在了2毫升54% (w / v) Iodixanol垫通过一层8毫升的20% (w / v) Iodixanol离心134000 g 4 h。收获的条带用缓冲盐水稀释，在Amicon旋转柱中浓缩，然后加载到15%、25%、35%和54%（w/v）碘二醇的第二次不连续梯度上，并以相同的速度离心约15小时。
方法注释
1．当病毒在两层碘克沙醇的交界面被结合，并随后被覆盖到第二个类似的梯度上时，在收集结合材料时必须非常小心，以避免清除过多的致密层。此可借由先移除较高密度层之大部分，然后移除低密度层之大部分来促进。
2．虽然可以通过超滤来稀释和减少收获的体积，以便在第二个梯度上重新装入低密度介质，但一个有用的替代方案是通过浮选进行第二个梯度。将试样调整为较高密度并加载于第二不连续或连续梯度的底部。
新城疫病毒（Newcastle disease virus）纯化
Biswas等人使用10-26% (w/v)碘克沙醇连续梯度，在80000g离心2小时的情况下研究了NDV和人血清之间的相互作用。根据沉降速率的不同，梯度中的分离可能包含一定程度的分辨率。融合蛋白和基质蛋白向梯度中部和人血清方向条带，导致蛋白发生小的高密度转移，并在梯度底部出现大量聚集的病毒。补体C3组分分布较广，也在梯度的中间，融合蛋白和基质蛋白重叠，但未出现在非常密集的区域。在没有病毒的情况下，这些补体蛋白仅在低密度区条带。
猪副粘病毒（Pig paramyxovirus）纯化
两种猪副黏病毒已在14-26 (w/v)碘克沙醇梯度中纯化，该梯度是通过用PBS稀释OptiPrep™制备的。将细胞裂解物在梯度上方分层，并在摇桶转子中以250,000 g离心1.5 h。未说明病毒的显带密度。
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