【Genovis】GlycOCATCH，O-糖蛋白的富集

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G3-OC6-002 GENOVIS

GlycOCATCH是一种纯化粘蛋白型O糖基化蛋白和多肽的亲和树脂。该亲和树脂包含非活性的OpeRATOR酶，该酶被设计用于高亲和力结合O-糖基化蛋白和肽。GlycOCATCH的应用包括O-糖蛋白和多肽的特异性富集或去除、糖组学、复杂样品的研究和生物制药的表征。

◆◆粘蛋白型O-糖基化蛋白和肽

◆◆与携带粘蛋白型O-聚糖的糖蛋白和肽结合

◆◆2小时工作流程

◆◆使用SialEXO(试剂盒中包含的)去硫酰化，增加了结合

亲和纯化工作流程

GlycOCATCH是以小柱形式提供的，可以方便地富集粘蛋白O型糖蛋白。GlycOCATCH蛋白与O-糖蛋白具有高亲和力结合，由于相互作用强，使用8 M尿素进行洗脱。

另外，洗脱可以用所含的OpeRATOR酶进行，该酶消化O-聚糖位点N端结合的O-糖蛋白。在这个实验中，肽在自然条件下回收。由于非唾液酸化的O-聚糖更有效地结合到树脂上，试剂盒包含唾液酸酶混合物SialEXO。

产品形式

用于粘蛋白型O-糖蛋白

亲和纯化和富集的树脂

利用GlycOCATCH®选择性纯化O-糖基化多肽

在这里，我们从肽水平研究了GlycOCATCH的O-聚糖特异性。O-糖基化肽被添加到非糖基化肽的混合物中，并上样到GlycOCATCH上，树脂被洗涤，结合的肽被8 M尿素洗脱。样品纯化后，用RP-LC-MS进行分离和分析。数据显示，选择性纯化的糖酵母蛋白肽（glycodrosocin peptide)，携带一个核心1 O聚糖。

使用GlycOCATCH进行亲和纯化携带核心1 O-聚糖的O-糖基化肽(糖酵母蛋白肽glycodrosoin)的选择性纯化。

使用GlycOCATCH®亲和纯化O-糖基化蛋白

在质谱分析之前，GlycOCATCH可用于O-糖基化多肽和蛋白质的特异性富集。

GlycOCATCH的强结合能力被有效地用于从复杂的基质(如人血清)中富集O糖基化蛋白。

从人血清中富集O-糖蛋白。用SialEXO处理人血清，并在GlycOCATCH树脂上孵育。洗脱后的蛋白质经变性、还原、烷基化和胰酶消化。采用RP-LC-MS/MS对多肽进行分析，并在瑞士Prot数据库中检索。上图列出了识别出的O-糖基化蛋白和其他具有大于12匹配肽段的蛋白，以及MASCOT得分大于200的。