【Wako】Phos-tag™系列产品
Phos-tag™系列产品是Wako公司旗下研究的分析蛋白磷酸化的新方法。FUJIFILM Wako Pure Chemical是日本一家以先进的技术开发为基础，提供高性能、高质量的试剂、化学产品和临床诊断的公司。
Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子，更容易分离和检测分析磷酸化蛋白，具有可识别和捕捉所有氨基酸位点上的磷酸化基团、无放射性以及不影响质谱分析等后续实验的优势。
▍▏SDS-PAGE 分离磷酸化蛋白——Phos-tag™ Acrylamide（Phos-tag™ 丙烯酰胺）
Phos-tag™ SDS-PAGE可根据迁移率不同，区分磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白。只需在常规的SDS-PAGE凝胶中添加Phos-tag™ Acrylamide和锌离子或锰离子即可进行实验。
●不含放射性元素，非荧光物质
●不同位点磷酸化修饰的蛋白在同一泳道中因迁移率不同而被分离开来
●操作过程与常规SDS-PAGE相类似
●Phos-tag™ 的结合特异性与氨基酸种类、序列无关
●Phos-tag™ SDS-PAGE实验后，可进行常规的免疫印迹或者质谱实验， 也可进行2维电泳
●可区分磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白
●Phos-tag™ Acrylamide母液可稳定保存至少3个月
▍▏SuperSep Phos-tag™ 预制胶
SuperSep Phos-tag™ 是一种预制胶，预先加入50 μmol/L 的Phos-tag™ Acrylamide，打开包装即可直接使用。
●即开即用
●预制胶使用安全
●有效期最长6个月
●操作与普通SDS-PAGE一样
适用于Bio-Rad伯乐电泳仪
适用于Life Technologies电泳仪
▍▏质谱分析磷酸化蛋白——Phos-tag™ Mass Analytical Kit（Phos-tag™ 质谱分析试剂盒）
Phos-tag™ Mass Analytical Kit是用于质谱分析的试剂套装。可配套MALDI-TOF/MS使用，用于检测磷酸化多肽 - Phos-tag™ 复合体，通常可提高低磷酸化分子的检测灵敏度。
●CH3COO等价结合在Phos-tag™ MS-101上
●在溶液中，不含有阴离子的Phos-tag™ MS-101带有+3价
●检测前需制备1 mM的Phos-tag™ MS-101L，MS-101H 或者MS-101N（溶于水）
试剂盒组成
▍▏纯化富集磷酸化蛋白——Phos-tag™ Agarose（Phos-tag™ 琼脂糖）
在生理条件下，Phos-tag™ Agarose为分离、浓缩天然磷酸化蛋白和生物样品中的磷酸化多肽提供一种高效的方法。
● 缓冲液不含有还原剂和去污剂，纯化过程中蛋白不会变性，可进行后续免疫共沉淀（Co-IP）实验
●可1小时内纯化磷酸化蛋白
●Phos-tag™ Agarose 捕获结合到Tyr，Thr，Ser，Asp，His等氨基酸、糖类、脂类上的无机磷酸根（HOPO3 2-）和大量二价磷酸根 （ROPO32-）
▍▏磷酸化肽纯化工具——Phos-tag™ Tip（含有Phos-tag™ 琼脂糖的枪头）
可特异性捕捉磷酸基团的功能性分子“Phos-tag™”的磷酸化肽纯化用枪头。枪头里含有Phos-tag™ 琼脂糖，是即开即用的前处理工具。
Phos™ Tip的结构
▍▏免疫印迹检测磷酸化蛋白——Phos-tag™ Biotin（Phos-tag™ 生物素）
Phos-tag™ Biotin（Phos-tag™ 生物素）是与生物素结合的 Phos-tag™，可用于免疫印迹法检测磷酸化蛋白。Phos-tag™ Biotin BTL-104可灵敏检测PVDF膜上的磷酸化蛋白。
● 无辐射
● 无需PVDF膜的封闭处理
● Phos-tag™ 的特异性结合与氨基酸种类、序列无关
● 不影响2维电泳和质谱分析等后续实验
● Phos-tag™ BTL母液可稳定保存至少6个月
● 实验流程与使用HRP标记抗体相类似
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