【Wako】MagCapture™ 外泌体提取试剂盒
MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS采用磷酯酰丝氨酸(PS)亲和Tim4蛋白固化磁珠(PS亲和法)的方法可以简便快捷地提取高纯度的完整外泌体和其他细胞外囊泡(EVs)。如果想要得到更高纯度的外泌体,请使用10,000×g离心后的上清。
该试剂盒使用含有EDTA的中性洗脱缓冲液将外泌体完整洗脱下来,所提取的完整外泌体和其他EVs可用于不同实验,包括电镜分析(TEM)、纳米粒子追踪(NTA)分析、投喂实验、分子组成(蛋白质、脂质、核酸等)分析等。
▍▏膜表面磷脂酰丝氨酸(PS)亲和法
Tim4蛋白固化磁珠,在金属离子存在的条件下亲和细胞外囊泡表面的磷酯酰丝氨酸(PS),然后使用含有EDTA的洗脱液进行洗脱,捕获高纯度的完整细胞外囊泡
▍▏优点·特色
磷脂酰丝氨酸(PS)亲和方法可获得高纯度的外泌体
使用新型亲和提取方法
● 通过PS亲和分子回收
● 低背景值
● 在中性条件下通过螯合试剂进行温和洗脱
※ 可获得高纯度,完整的外泌体
无需进行超离
● 使用磁珠改进了操作
● 流程优化
※ 高重复性
样品类型:细胞培养上清、血清、血浆、尿液等。
● 可以纯化高纯度和完整的细胞外囊泡
● 可以从细胞上清液、血清、血浆和尿液中纯化外囊泡
● 重复性高,回收量稳定
● 简易操作(约3.5小时)
● 启用多个样品(无需超速离心)
▍▏案例·应用
从血清、血浆、尿液中提取的细胞外囊泡的分析
从人血清中提取外泌体的产量比较
使用该试剂盒,超离法和抗体亲和法提取人血清的外泌体,接着用CD9和CD63抗体进行免疫印迹实验。
● 检测抗体
抗CD9兔多抗,System Bioscience公司
抗CD63兔多抗,System Bioscience公司
● 免疫印迹(WB)数据
各样品结果相当于150 μL的血清样本。从100 μL提取物中取出15 μL,添加5 μL的4×SDS样品缓冲液,全部上样。
从人EDTA血浆中提取外泌体
分别从1 mL的EDTA血浆、EDTA血浆(超滤更换缓冲液)、人血清中提取外泌体,进行WB检测(抗Flotillin2抗体)。
●检测抗体
抗Flotillin-2小鼠单抗(29/Fotillin-2),BD Bioscience公司
●使用样品量
各1 mL
●免疫印迹(WB)数据
各样品结果分别对应150 μL样品量。从100 μL提取物中取出15 μL,添加5 μL的 4×SDS样品缓冲液,全部上样。
从人尿液中提取外泌体的回收量比较
1 mL人尿液分别通过本试剂盒、聚合物沉淀法、超离法进行外泌体回收,并做免疫印迹(WB)检测(抗CD9抗体)。
● 检测抗体
抗CD9兔多抗,System Biosciences公司
● 使用样品量
各1 mL
● 免疫印迹(WB)数据
各样品结果分别对应150 μL尿液样品。从100 μL提取物中取出15 μL,加入5 μL的 4×SDS样品缓冲液,全部上样。
▍▏MagCapture™外泌体提取试剂盒 操作步骤
▍▏产品列表
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