【Wako】未分化ES/iPS活细胞荧光标记rBC2LCN

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▍▏rBC2LCN（AiLecS1）

rBC2LCN（AiLecS1）是在伯克霍尔德氏菌（Burkholderia cenocepacia）来源凝集素BC2L-C的N末端域表达的重组凝集素。

由于rBC2LCN对存在于人ES/iPS细胞表面的足糖萼蛋白（Podocalyxin）上的粘蛋白样O-型糖链的H型3（Fucα1-2Galβ1-3GalNAc）具有高亲和力，因此可用作人ES/iPS细胞的未分化标志物。

本产品是荧光染色标记，能直接添加到人ES/iPS细胞的培养液中，实现未分化活细胞分析。适用于未分化细胞检测用标记。可用于细胞染色，流式细胞仪。另外，使用本品持续培养数日已确认细胞无毒性。

我们供应绿色荧光标记（FITC），黄色荧光标记（Cy3），红色荧光标记（Cy5）的三种类型的系列商品。

▍▏特点

● 添加到培养基即可进行染色

● 无需固定细胞，活细胞也可直接进行明显染色

● 细胞毒性低，染色后也可培养

● 识别Tra-1-60, Tra-1-81, SSEA-3, SSEA-4细胞表面存在的糖链

● 可用于细胞染色和流式细胞仪

▍▏产品概述

● 已进行无菌试验（0.1 μm过滤器进行灭菌）

● PBS(-)溶液

● 使用时稀释比

Live Cell Imaging 1:100～1,000
Flow Cytometry 1:100～1,000

● 激发波长/发射波长

▍▏人iPS细胞的活细胞染色（Live Cell Imaging）

● 用rBC2LCN-FITC， rBC2LCN-635以及Hoechst33342对人iPS细胞201B7株进行染色处理。（无细胞固定）

（稀释倍数 1:1,000）

● 用rBC2LCN-FITC，Tra-1-60，Tra-1-81，SSEA-4，对人iPS细胞201B7株进行染色处理。

2小时后确认染色图像。（未固定细胞）

（稀释倍数 1:100）

★ 与Tra-1-60, Tra-1-81相比较, rBC2LCN的活细胞染色度更强。

★ 即使交换培养基，rBC2LCN染色第二天后染色效果依然明显。

▍▏人ES细胞的活细胞染色（Live Cell Imaging）

使用rBC2LCN-FITC对人ES细胞WA01株进行染色（未细胞固定）。细胞的一部分无法维持未分化状态而进行分化。如果使用rBC2LCN-FITC对活细胞进行染色，以维持未分化状态部分已染色，而已分化部分未染色来进行区分。

＜数据提供国家研究与发展公司先进工业科学和技术研究院新药开发的基础研究部门恭子小沼老师，伊藤弦老师＞

▍▏人iPS细胞固定后染色

将人iPS细胞201B7株用多聚甲醛固定后，使用rBC2LCN和DAPI进行细胞染色。

对于人iPS细胞毒性评估

向人iPS细胞201B7株的培养液中分别添加其1/1,000、1/100、1/50量的rBC2LCN-FITC，持续培养。其结果是，不存在rBC2LCN-FITC浓度对毒性影响，不同浓度的细胞增殖程度相同程度。

〔细胞株〕
人iPS细胞201B7株

〔培养基组成〕
StemSure^® hPSC培养基Δ+35ng/mL bFGF

〔涂层〕
Matrigel^® hESC-Qualified Matrix

〔细胞接种数目〕
4×10⁴cells/well（12孔板）

使用Flow Cytometry进行人iPS细胞分离

使用rBC2LCN-FITC及rBC2LCN-6547、rBC2LCN-635对人iPS细胞201B7细胞株和人正常二倍体成纤维细胞染色，进行流式细胞术。

实验结果：未分化的人iPS细胞与分化的人二倍体成纤维细胞成功分离。

▍▏产品列表

相关产品

★rBC2LCN剥离液★

本产品能够将结合在人ES细胞▪ 人iPS细胞表面糖链的rBC2LCN凝集素从细胞里面剥离出来。剥离rBC2LCN之后的细胞能够进行抗体染色，可以继续培养。

★BC2LCN凝聚素, 重组体、溶液未标识rBC2LCN系列★

※ 仅供实验使用，不可用于临床诊断。

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发布日期：2024-05-14 15:20:56
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