【BioLegend】 重组蛋白介绍

Biolegend 重组蛋白种类在不断增加，现在已经包含超过 600 种不同功能的重组蛋白，可用于人类、小鼠和大鼠的多个不同研究领域的细胞生物学研究，包括免疫学、神经生物学、干细胞研究、癌症研究、糖生物学等细胞生物学研究。

我们目前的重组蛋白：

◆纯度高于 95%
◆批次间稳定性好
◆有竞争力的价格
◆量大从优
◆可以为客户提供灵活的包装规格

BioLegend 重组蛋白将加快您的实验进程

◆我们目前的重组蛋白产品已经包括了细胞因子、趋化因子、生长因子、酶、黏附分子等。
◆重组蛋白表达系统为大肠杆菌、昆虫细胞以及哺乳动物细胞
◆产品可以用于体内、体外功能学实验
◆可以灵活的定制重组蛋白
◆对于特殊需要的实验，可以提供无载体或无动物成分的重组蛋白产品
◆无动物成分，可以避免动物病原体污染而导致实验差异。

我们的重组蛋白产品普遍应用于：

◆细胞培养    ◆细胞活化           ◆干细胞分化
◆细胞活化    ◆细胞因子生产     ◆细胞毒性
◆细胞扩增    ◆生长和增殖        ◆细胞趋化
◆分化           ◆抑制                ◆细胞信号激活
◆酶切           ◆ELISA              ◆WB 对照

为了确保我们的产品质量，Biolegend 重组蛋白在出厂前均已通过严格的质量检测。

产品质量检测:

◆蛋白质参数确定: SDS - PAGE, HPLC, 以及 Mass Spec 分析
◆纯度检测: SDS - PAGE 和 HPLC 分析
◆蛋白成分检测: UV spectroscopy, SDS - PAGE 分析
◆微生物污染控制：重组蛋白溶液均通过 0.2μm 的微孔滤膜过滤，然后装瓶封装。

产品功能检测:

基于预期的蛋白质功能，为了保证重组蛋白产品的生物活性，我们根据重组蛋白的功能，研究团队针对性的做了几种不同的生物学实验加以检测。包括：

◆增殖实验          ◆酶催化实验         ◆细胞黏附实验

◆轴突生长实验   ◆细胞毒性实验     ◆细胞分化实验

◆细胞趋化实验   ◆细胞因子产生实验

稳定性检测:

我们的重组蛋白经过不同的温度、时间的检测以确定最适的储存、操作、以及运输条件。我们的检测结果表明，绝大部分重组蛋白可以在室温条件下放置一周而没有明显的生物活性丢失。此外，我们的检测也表明，绝大部分重组蛋白能够经受住四次反复冻融而没有明显的生物活性丢失。

内毒素检测:

为了确保产品足够的安全，我们的重组蛋白产品经过严格的鲎试剂检测法以检测内毒素含量。检测结果表明我们重组蛋白产品的内毒素水平低于 0.1ng/μg 蛋白或者低于 1EU/μg 蛋白。但是，对于大部分重组蛋白产品，实际测量的内毒素值一直低于该规定的值。

Competitor and Internal Control Testing 竞争产品和内部控制测试

我们检测表明 BioLegend 重组蛋白批次间的稳定性较好，同时也与市面上同类产品做了功能对比实验，结果表明我们的产品可以很好替代市面上相同的重组蛋白产品。因此可以确保您放心使用我们的重组蛋白产品。

Recombinant human IL-15 induces the proliferation of M07e human megakaryoblastic leukemia cell line in a dose dependent manner.
BioLegend’s protein was compared side-by-side to a competitor’s equivalent product.

定制解决方案:

我们致力于为客户节约时间与成本。我们提供以下定制解决方案：
◆订制重组蛋白产品
◆定制生物检测研发

Botulinum toxin (Botox) is a large protein that is composed of three domains (upper right corner, crystal structure shown in yellow, green, and pink).

The new study reveals a novel mechanism by which the toxin hijacks three receptors on the host neuronal surface as its "GPS" – the peptide moiety of protein SV2 (green-blue ribbon model), a conserved glycan modification of SV2 (green and light blue sticks), and a lipid (brown sticks) – to launch its attack. SUMO-gSV2C and gSV2C were expressed and secreted from HEK 293 cells from BioLegend.

Sample Testing
Need a sample to test your system and set-up before you purchase? Contact us. We are here to meet your needs.

Bulk Product Requests
BioLegend is proud to offer special discounts for bulk orders on all of our protein products. Get large quantities of the same high quality recombinants you find in our single vials, at an exceptional price.
Email sales@biolegend.com (for US and Canada) or distributorsales@biolegend.com (for international orders).

细胞因子是细胞间信息沟通的重要因子，涵盖很多功能。这些因子可以激发或抑制炎症，促进细胞生长或者促使细胞分化为特异的表型细胞。细胞因子通过结合相应的受体，激活信号通路，促使下游基因表达而调节他们的功能。

细胞因子 (carrier-free):

Comparative Analysis

Th17 细胞极化用 BioLegend 重组蛋白:

趋化因子是能够诱导细胞运动或趋化性的一类相对分子量较小的细胞因子。趋化因子分子中包括数个 (多数是 4 个) 半胱氨酸在蛋白质保守位点上。这些半胱氨酸 (C) 通过形成分子内二硫键，从而稳定了趋化因子的蛋白质结构。

4 个半胱氨酸残基中的前两个半胱氨酸残基之间的氨基酸残基间隔和氨基酸残基个数 (表示为 X) 决定了趋化因子的种类。趋化因子受体包含七次跨膜结构区，其中大多数趋化因子的受体是非特异性受体，其可以与多种不同趋化因子相结合。

Learn more at: biolegend.com/chemokine_receptors

Chemokines Product List (carrier-free format):

Comparative Analysis

■BioLegend ●Competitor A

生长因子是一类由体细胞产生的蛋白质，可以调控细胞生长、分化、存活。例如：有些生长因子可以让细胞分化，而有些生长因子，可以让细胞分裂生长。

目前已经发现了许多不同种类的生长因子，其中一种分类方法是通过每个生长因子影响特定细胞类型和功能加以分类。例如：

◆表皮生长因子家族 (EGF) - 细胞生长
◆血管内皮生长因子家族 (VEGF) - 控制血管形成
◆血小板衍生生长因子家族 (PDGF) - 控制血管形成和细胞生长
◆成纤维细胞生长因子家族 (FGF) - 细胞生长
◆转化生长因子 beta (TGF-beta) 超家族 -
包括: TGFbeta-1/2/3, Activins, BMPs, GDFs

生长因子的活性是通过结合跨膜受体实现的，这些受体常常包含一段位于胞浆内的酪氨酸激酶。然后会引发不同的下游信号通路的级联反应，例如 ras-raf-MAP-fos 或者 PI3K-Akt-mTOR 信号通路。从而调控靶细胞的生长和分化。通常的，生长因子不会以自分泌的方式起作用，这是由于生长因子半衰期较短并且在细胞外基质中扩散较慢。

Growth Factors Product List (carrier-free format):

Comparative Analysis

酶是生物催化剂，调节化学反应的分子。酶可以特异性的识别他们的底物。BioLegend 提供几种不同的酶，包括作为研究工具的蛋白酶。

蛋白酶，也称为蛋白水解酶，肽酶，能够催化水解肽键。大部分蛋白酶可以水解氨基酸之间的 α - 肽键。根据酶催化不同的水解反应，将蛋白酶分为 6 类:

◆丝氨酸蛋白酶
◆谷氨酸蛋白酶
◆苏氨酸蛋白酶
◆天冬氨酸蛋白酶
◆半胱氨酸蛋白酶
◆金属基质蛋白酶

最近，在 2011 年描述了第七种催化型蛋白酶 —— 天冬酰胺肽裂解酶。其蛋白催化机制不同于前几种蛋白水解酶，因为它催化的不是水解反应，而是消除反应。

通过高度特异性的催化反应，酶及其调节子（如抑制剂）可以调节许多蛋白质的命运、定位和活性；调节蛋白 - 蛋白之间的相互作用；产生新的有生物活性的生物分子，并且有助于胞内信号转导。酶及其调节子影响了许多重要的细胞生命过程，包括 DNA 复制和转录，细胞增殖和分化，组织形态发生和重塑，神经发生、免疫、自噬和细胞凋亡等等。

Enzymes and Regulators Product List (carrier-free format):

Featured Data

Comparative Analysis

细胞粘附分子 (CAM) 是介导细胞间和 / 或细胞与细胞外基质 (ECM) 相互作用的蛋白质。大多数 CAM 属于四个蛋白质家族：Ig (免疫球蛋白) 超家族，整合素，钙粘蛋白和选择素。由 CAM 介导的相互作用产生的生物效应本质上可以是粘附性的或排斥性的 (抑制性的)。这些相互作用与细胞内信号传导，细胞骨架组织或基因表达的变化相关，因此，CAM 在几种细胞过程中起重要作用，包括细胞生长，分化，细胞迁移和癌症转移。

受体是通过其识别各自配体并响应信号的蛋白质。每个受体与特定的细胞生物化学途径相关。复杂的受体系统包括信号受体，非信号诱导受体，受体相关蛋白和可溶性受体。

天然存在的可溶性受体可以通过几种机制产生，其包括细胞表面受体胞外域的蛋白水解切割，mRNA 转录物的选择性剪接，不同基因的转录，GPI 锚定受体的切割，和细胞外释放的膜结合囊泡受体，如外泌体。可溶性受体的实例包括结合细胞因子并在细胞因子信号通路中起激动剂或拮抗剂作用的细胞因子受体。这些受体是炎症和免疫的重要调节因子。BioLegend 的受体蛋白组合包括许多靶标的可溶性受体，包括可溶性细胞因子受体，可溶性生长因子受体和可溶性 TNF 超家族受体。这些蛋白质仅仅由编码细胞外受体结构域的基因表达产生，缺乏跨膜结构域和胞质的尾端。

Comparative Analysis

除了上述产品类别之外，我们还有其他重组蛋白产品可用于多种生物学功能研究，这些蛋白已被证明在许多细胞生命过程中发挥了重要的作用，包括细胞迁移、生存，调节免疫反应以及调控细胞凋亡，神经性炎症，阿尔茨海默症，控制肿瘤细胞表型和自身免疫性疾病。

BioLegend 的无动物成分重组蛋白质生产线在生产过程中大大减少了哺乳动物病原体导致的差异和潜在的污染。所有这些蛋白质都是在无动物成分的培养基中生产的，而纯化设备本身也是无动物成分的。这些无动物成分版的蛋白质与非无动物成分的相对应蛋白质起着相似的功能。Biolegend 提供冻干粉样无动物成分的重组蛋白，用它来处理您的细胞将让您的细胞更有活力。

Learn more at: biolegend.com/recombinant_proteins

具有准确的标准品对于 ELISA 实验结果的准确性和可靠性至关重要。BioLegend 提供冻干粉样的重组蛋白标准品，并优化了同 ELISA 抗体对的结合。BioLegend 的 ELISA 标准品以载体蛋白形式存在以确保产品的稳定性并防止产品粘附于小瓶壁上。

我们的重组蛋白的生物活性通常使用生物测定法进行检测，并在我们的数据表中用特定的活性范围 / ED₅₀表示。蛋白质的特异性活性非常依赖于细胞类型和用于测试的生物实验。由具有丰富生产和测定经验的专业科学家组成的生物检测团队，基于蛋白质的生物学功能设置了合适的实验条件，从超过 20 种不同类型的剂量反应生物测定法中至少选择一种，对每一批的重组蛋白质进行测定。以下例子是我们蛋白质的生物测定实验和 ED₅₀值。

1.增殖实验

Proliferation of cells induced by increasing concentrations of recombinant proteins is measured by metabolic fluorescence assay using our Deep Blue Cell Viability™ Kit (Cat. No. 424701).

2.增殖抑制实验

This assay detects the inhibition of cell proliferation with increasing concentration of the recombinant protein using Deep Blue Cell Viability™ Kit (Cat. No. 424701).

3.细胞毒实验

Cytotoxic effects of increasing concentration of the recombinant protein is measured by fluorescence assay using our Deep Blue Cell Viability™ Kit (Cat. No. 424701).

4.细胞因子诱导产生实验

Detection of induced cytokines in the cell by increasing concentrations of the recombinant protein is detected by cytokine - specific ELISA assay.

5.细胞因子产生抑制实验

Inhibition of cytokine production by the cells is measured by ELISA in the presence of increasing concentrations of the recombinant protein.

6.红细胞凝集实验

Agglutination of RBCs is a simple visual assay using different titrations of the recombinant proteins.

7.结合实验

Binding of receptor-ligands is measured by functional ELISA, and binding of proteins-cells is determined by fluorescence assay.

8.分化实验

Differentiation of cells by varying concentrations of the protein is measured by alkaline phosphatase induction assay.

9.轴突生长实验

Neurite outgrowth or inhibition is determined by checking the morphology of neurons in the presence of varying concentrations of the protein.

10.酶催化实验

Activity of the enzyme or inhibitor is measured by its ability to cleave a fluorogenic or chromogenic substrate in the presence of increasing concentrations of the protein.

11.趋化实验

The ability of the recombinant protein to induce chemotaxis is measured by counting the cells by FACS, or by Deep Blue Cell Viability™ Kit (Cat. No. 424701) to detect cell migration.

For detailed information about these or any other protocols, please contact: tech@biolegend.com

▲和竞争产品相比，你们的重组蛋白的活性如何？

针对每一个货号每一个批次的重组蛋白产品，我们都进行严格的质量监控。我们不但检测自有产品的生物活性，而且和市面上同类产品的生物活性进行比较，确保我们重组蛋白产品的生物活性优于或者类似同类重组蛋白产品的生物活性。为了给您提供更好的重组蛋白，我们保证我们的所有检测都是非常严格。如果您对重组蛋白产品有任何问题，请联系 sales@biolegend.com

▲我购买的重组蛋白的 ED50 是多少？

重组蛋白的特异活性范围可以在重组蛋白产品附带的说明书上查到。由于检测具体重组蛋白活性范围会受细胞密度、细胞传代次数、培养条件等等因素的影响，活性单位数值 (unit/ml) 可能有所差异。

▲重组蛋白是否会因为不同的批号而导致活性不同？

具体的活性会因每个批次和实验的类型而异，但是我们所有通过检测的不同批次的产品的活性范围将在已检测的 ED50 范围内上下浮动。但是我们保证我们不同批次间的产品具有良好的一致性。但您可以自行选择针对性实验加以验证，以找出您的特定实验中的最佳 ED50。

▲怎么将 ED50 转换成一个特定的比活性单位 (units/ml)?

Use the formula Specific activity (Units/mg) = 10⁶/ED50 (ng/ml)

▲无载体的重组蛋白和有载体的重组蛋白之间的差别是什么？

我们所有的无载体和无动物成分的重组蛋白质在制备中不含有任何载体蛋白，如 BSA。通常，我们的 ELISA 标准重组蛋白将载体蛋白添加到制剂中以增加产品稳定性，并避免产品粘附到小瓶的壁上。当不需要载体的存在时，可以直接选择无载体蛋白形式的重组蛋白产品。当载体蛋白质不影响研究结果时，客户可以自行决定使用何种类型的重组蛋白质，以及是否需要将载体蛋白添加到重组蛋白储存液中。

▲BioLegend 的重组蛋白如何运输？

我们所有的重组蛋白在运送途中都是保存在蓝冰上。这些产品已通过验证，在使用蓝冰运输后依然能够良好的保持其生物活性。

▲无载体和无动物成分的重组蛋白之间的差异是什么？

我们的无动物成分产品在整个生产过程中，不会接触任何动物成分。这包括使用无动物成分培养基和纯化设备。对哺乳动物病原体污染特别敏感的生物学研究可能需要使用无动物成分重组蛋白产品。我们的无载体产品不含任何载体蛋白，但它们是使用含有动物成分的培养基生产的。这两个形式的重组蛋白具有相似的生物学活性和功能，尽管具体的生物活性可能会依赖于不同的批次。

▲拿到重组蛋白后，应该怎么溶解、稀释蛋白质？我应该如何长期储存？

我们的大多数无载体重组蛋白是以液体形式运输，因此无需重悬。我们的无动物成分重组蛋白是以冻干粉形式运输，蛋白质各项重要信息在附带的说明书上有显示。如果需要稀释，请参考产品数据表中的说明推荐使用。储存液应该含有载体蛋白，例如 1% 的 BSA 或 HAS 或者 10% FBS (对于趋化因子，使用 BSA 或 HSA) ，并以 50 - 100ug/ml 的浓度进行保存。对于需要长期储存的产品，请等量分装在无菌的 EP 管中，并存储在手动除霜的冰箱中，避免反复冻融。

▲BioLegend 是否在体内检测来验证重组蛋白的生物活性？

在数据表中所展示的蛋白质活性数据是在体外检测得到的，而不是进行体内检测。但是，我们所有的无载体和无动物成分重组蛋白都可应用于体内研究，已经有许多客户使用我们各种类型产品成功的用于体内外的研究。

▲BioLegend 的重组蛋白是否适合体外和体内生物检测？

BioLegend 的重组蛋白质溶液通过 0.2um 的微孔滤膜过滤后，然后分装装瓶。此外，我们的重组蛋白经过严格的内毒素检测，并且保证内毒素水平低于 0.1ng/ug 蛋白。因此我们的所有重组蛋白都可以安全地用于体外和体内生物实验。

▲实验室 (观察) 单位和国际单位有什么区别？

国际单位与使用特定活性单位之间没有直接的关系，因为我们不使用世界卫生组织 (WHO) 推荐的国际标准，比较两种不同标准的蛋白质活性的最佳方法是通过使用相同的生物系统进行测试。