【BioLegend】Flex-T™ 产品介绍
Biolegend Flex-T™：DIY 属于自己的 MHC 四聚体，抗原特异性 T 细胞分析的理想工具
T 细胞介导的免疫应答是由抗原递呈细胞和T细胞之间通过主要组织相容性复合物（MHC）和T 细胞受体（TCR）的相互作用决定的，因此鉴定和分析抗原特异性 T 细胞在疫苗疗效监控，癌症研究、病毒感染、抗原分析等研究中至关重要。MHC分子将抗原多肽呈递给能识别该抗原肽的抗原特异性T细胞，但是可溶性的MHC单体与TCR 亲和能力较弱，易解离。而荧光标记的 Streptavidin可与多个 MHC单体（Monomer）偶联形成四聚体复合物（Tetramer），Tetramer 可与多个TCRs 结合，亲和力的提高可产生更稳定的相互作用，从而有效地用于抗原特异性 T 细胞的流式检测。
Biolegend Flex-T™
Biolegend 提供的 UV-labile Peptides Monomer 可以通过加入不同的抗原肽，灵活地 “DIY” 不同的 Tetramer，用于检测不同的抗原特异性 T 细胞。Flex-T™ UV-labile Momomer 由生物素化的 MHC 单体和 UV 可降解预载多肽组装而成，经过 UV 照射后，结合位点暴露，感兴趣的目标肽加载至结合位点，产生具有足够亲和力的 “DIY” MHC Monomer，肽交换效率可使用 ELISA 进行检测，“DIY” MHC Monomer 与 Streptavidin 组装成不同的 Tetramer。这种灵活的处理方式实现了感兴趣多肽或者抗原特异性 T 细胞的高通量筛选。
Human|Mouse
UV labile-Peptides Monomer | Fixed-Peptides Monomer | Custom Monomers and Tetramers
基本流程
抗原特异性 CD8+ T 细胞分析示例。A）首先在淋巴细胞群（FSC VS SSC）下圈出 CD8+ 7-AAD- 活性T细胞，Exclusition cocktail (Alexa Flour 700 anti-CD4，CD19，CD14 和 CD16)；B）其次，在CD8+T 细胞群体下分析同时被 APC 和 PE Flex-T™标记的抗原特异性T细胞。HLA-A*11:01 Flex-T™加载了 EBV 抗原肽 (IVTDFSVIK)。
肽交换效率检测
只有当多肽位于 MHC 凹槽内，复合物才能保持完整，只有完整的 HLA / 多肽复合物可以被识别；该检测系统只能检测具有高亲和力肽，对 HLA 中等或者低亲和力多肽只能检测到相对较弱信号。
LEGEND MAX™ Flex-T™ Human Class I Peptide Exchange ELISA Kit；
Flex-T™ HLA-A*02:01 UVX monomer 分别与阳性肽、阴性肽、待检测肽或不加任何肽段的条件，使用 366nm UV 照射；肽交换后的的产物经过稀释后使用 Elisa 分析；（上图）450nm-570nm 吸光值；（下图）使用阳性肽标准化的交换效率。
备注：阴性肽及阳性肽序列可参考产品说明书或者 Biolegend 官网。
双色 Tetramer
高通量特异性多肽筛选
使用 FLex-T™ Tetramer 分析抗原特异性 T 细胞时，每一种 Tetramer 只能检测小部分相应的特异性 T 细胞，若需要大量筛选多种不同抗原特异性 T 细胞时，可能需要大量血液或者其他样本。样本珍贵或者需要同时筛选的情况下，可以使用 “Combinatorial Color coding” 方法，即每一种多肽 Momomer 分别与两种标记不同荧光素的 Streptavidin 偶联成 Tetramer，该多肽获得一个Two-color-code；每种抗原特异性 T 细胞 TCR 可以同时被这两种带不同荧光但是相同多肽的 Tetramer 识别，流式检测获得双阳性抗原特异性 T 细胞。
可同时检测的抗原特异性 T 细胞种类数量取决于荧光素种类数量。例如若有 5 种荧光素被用于 Tetramer 标记，则可以产生 10 种独特的 Two-color-code 搭配组合，最多可同时检测 10 种不同抗原特异性 T 细胞；若有 8 种荧光素用于 Tetramer (如下表所示），则可以用 28 种颜色搭配，则可同时检测多达 28 种抗原特异性的 T 细胞；随着颜色种类增加，code 也相应增加，从而减少使用的样本量，这也是 Biolegend Flex-T™四聚体技术实现高效、经济、高通量筛选另一方面的体现。
产品系列
●Monomer 系列 1 人 HLA 预载 UV 可降解肽段 Monomer
Human Class I Biotinylated Monomers-UV-labile Peptides
货号 |
名称 |
规格 |
280001 |
Flex-T™ HLA-A*01:01 Monomer UVX |
50μg |
280003/280004 |
Flex-T™ HLA-A*02:01 Monomer UVX |
50|200μg |
280017 |
Flex-T™ HLA-A*02:03 Monomer UVX |
50μg |
280005 |
Flex-T™ HLA-A*03:01 Monomer UVX |
50μg |
280007 |
Flex-T™ HLA-A*11:01 Monomer UVX |
50μg |
280019 |
Flex-T™ HLA-A*24:02 Monomer UVX |
50μg |
280009 |
Flex-T™ HLA-B*07:02 Monomer UVX |
50μg |
280011 |
Flex-T™ HLA-B*08:01 Monomer UVX |
50μg |
280015 |
Flex-T™ HLA-C*04:01 Monomer UVX |
50μg |
Mouse Class I Biotinylated Monomers- Fixed Peptides
货号 |
名称 |
规格 |
肽段类型 |
280033 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (TLACFVLAAV) |
25 μg |
Membrane Protein |
280087 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*01:01 SARS-CoV-2 Monomer (ATSRTLSYY) |
25 μg |
Membrane Protein |
280089 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*03:01 SARS-CoV-2 Monomer (ATSRTLSYY) |
25 μg |
Membrane Protein |
280091 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*11:01 SARS-CoV-2 Monomer (ATSRTLSYY) |
25 μg |
Membrane Protein |
280113 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*11:01 SARS-CoV-2 Monomer (ATSRTLSYYK) |
25 μg |
Membrane Protein |
280115 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*03:01 SARS-CoV-2 Monomer (ATSRTLSYYK) |
25 μg |
Membrane Protein |
280021 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (GMSRIGMEV) |
25 μg |
Nucleocapsid |
280023 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (LLLDRLNQL) |
25 μg |
Nucleocapsid |
280093 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*03:01 SARS-CoV-2 Monomer (KTFPPTEPK) |
25 μg |
Nucleocapsid |
280095 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*11:01 SARS-CoV-2 Monomer (KTFPPTEPK) |
25 μg |
Nucleocapsid |
280109 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*11:01 SARS-CoV-2 Monomer (ATEGALNTPK) |
25 μg |
Nucleocapsid |
280111 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*03:01 SARS-CoV-2 Monomer (ATEGALNTPK) |
25 μg |
Nucleocapsid |
280123 |
Flex-T™ Biotin HLA-B*07:02 SARS-CoV-2 Monomer (SPRWYFYFL) |
25 μg |
Nucleocapsid |
280075 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (KLWAQCVQL) |
25 μg |
ORF1ab |
280077 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (ALWEIQQVV) |
25 μg |
ORF1ab |
280081 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*01:01 SARS-CoV-2 Monomer (TTDPSFLGR) |
25 μg |
ORF1ab |
280083 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*01:01 SARS-CoV-2 Monomer (PTDNYTTY) |
25 μg |
ORF1ab |
280085 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*01:01 SARS-CoV-2 Monomer (CTDDNALAY) |
25 μg |
ORF1ab |
280099 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*11:01 SARS-CoV-2 Monomer (KCYGVSFTK) |
25 μg |
ORF1ab |
280101 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*03:01 SARS-CoV-2 Monomer (MVTNNTFTLK) |
25 μg |
ORF1ab |
280103 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*11:01 SARS-CoV-2 Monomer (MVTNNTFTLK) |
25 μg |
ORF1ab |
280105 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*11:01 SARS-CoV-2 Monomer (VTDTPKGPK) |
25 μg |
ORF1ab |
280107 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*03:01 SARS-CoV-2 Monomer (VTDTPKGPK) |
25 μg |
ORF1ab |
280121 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*24:02 SARS-CoV-2 Monomer (YIGDPAQL) |
25 μg |
ORF1ab |
280125 |
Flex-T™ Biotin HLA-B*07:02 SARS-CoV-2 Monomer (RPDTRYVL) |
25 μg |
ORF1ab |
280127 |
Flex-T™ Biotin HLA-B*07:02 SARS-CoV-2 Monomer (IPRRNVATL) |
25 μg |
ORF1ab |
280079 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (LloydDANYFL) |
25 μg |
ORF3a |
280119 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*24:02 SARS-CoV-2 Monomer (VYFLQSINF) |
25 μg |
ORF3a |
280025 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (FIAGLIAIV) |
25 μg |
pike Protein |
280027 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (ALNTLVKQL) |
25 μg |
pike Protein |
280029 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (VLNDILSRL) |
25 μg |
pike Protein |
280031 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (WFLHVTYV) |
25 μg |
pike Protein |
280035 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (LITGRLQSL) |
25 μg |
pike Protein |
280037 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (NLNESLIDL) |
25 μg |
pike Protein |
280039 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (RLNEVAKNL) |
25 μg |
pike Protein |
280067 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (SIIAYTMSL) |
25 μg |
pike Protein |
280071 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (YLQPRTFL) |
25 μg |
pike Protein |
280073 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*02:01 SARS-CoV-2 Monomer (RLQSLQTYV) |
25 μg |
pike Protein |
280097 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*03:01 SARS-CoV-2 Monomer (KCYGVSPTK) |
25 μg |
pike Protein |
280117 |
Flex-T™ Biotin HLA-A*24:02 SARS-CoV-2 Monomer (QYIKWPWYI) |
25 μg |
pike Protein |
Mouse Class I Biotinylated Monomers- Fixed Peptides
货号 |
名称 |
规格 |
280045 |
Flex-T™ Biotin H-2 D(b) Flu Monomer (ASNENMETM) |
25 μg |
280047 |
Flex-T™ Biotin H-2 D(b) Flu Monomer (SSLENFRAYV) |
25 μg |
280065 |
Flex-T™ Biotin H-2 D(b) HPV16 Monomer (RAHYNIVTF) |
25 μg |
280041 |
Flex-T™ Biotin H-2 D(b) LCMV Monomer (FQPQQNGQFI) |
25 μg |
280043 |
Flex-T™ Biotin H-2 D(b) LCMV Monomer (KAVYNFATC) |
25 μg |
280059 |
Flex-T™ Biotin H-2 D(b) PMV Monomer (GAPRNRELF) |
25 μg |
280049 |
Flex-T™ Biotin H-2 K(b) LCMV Monomer (ISHNFCNL) |
25 μg |
280051 |
Flex-T™ Biotin H-2 K(b) OVA Monomer (SIINFEKL) |
25 μg |
280055 |
Flex-T™ Biotin H-2 K(b) Sendai Monomer (FAPGNYPAL) |
25 μg |
280061 |
Flex-T™ Biotin H-2 K(b) TRP2 Monomer (SVYDFFVWWL) |
25 μg |
280053 |
Flex-T™ Biotin H-2 K(b) W Monomer (TSYKFESV) |
25 μg |
280057 |
Flex-T™ Biotin H-2 K(d) EGFP Monomer (HYLSTQSAL) |
25 μg |
280063 |
Flex-T™ Biotin H-2 K(d) HIV Monomer (AMQMLKETI) |
25 μg |
Custom Monomers and Tetramers
名称 |
规格 |
Flex-T™ Custom HLA Monomer |
50 μg|200 μg |
Flex-T™ Custom HLA Tetramer |
50 tests|200 tests |
Flex-T™ Custom Mouse Monomers |
50 μg|200 μg |
Flex-T™ Custom Mouse Tetramers |
50 tests|200 tests |
ELISA Reagents
货号 |
产品 |
规格 |
447207 |
LEGEND MAX™ Flex-T™ Human Class I Peptide Exchange ELISA Kit |
1 pre-coated plate |
280302 |
Purified Streptavidin |
250 μg |
280303 |
HRP anti-human β2-macroglobulin antibody |
50 μg |
280301 |
Flex-T™ ELISA Positive Control |
20 μg |
点在看，传递你的品味
