【Wako】Supersep™ Phos-tag™ 预制胶

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Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能分子，可与蛋白上的磷酸基团结合。在SDS-PAGE中，在有二价金属离子（Mn²⁺/Zn²⁺）参与的条件下，磷酸化蛋白与Phos-tag™ 结合，电泳迁移速度变慢，从而与非磷酸化蛋白分离。

FUJIFILM Wako推出了即开即用型的SuperSep™ Phos-tag™ 预制胶，含有50 μmol/L的Phos-tag™ 丙烯酰胺，含有Zn²⁺ 作为金属离子，保存稳定性长达半年，得到的条带整齐。多种规格型号，适合Bio-rad/Life Technolofies/EasySeperator等多种电泳仪。全批次均经过严格检验，保证能分离磷酸化与非磷酸化条带。

▍▏应用实例

β-casein

使用Tris-甘氨酸（TG），Tris-Tricine（TT）或Tris-MOPS（TM）三种不同runningbuffer比较β-casein在SuperSep™Phos-tag™预制胶中磷酸化蛋白的迁移率。

Kinoshita-Kikuta, E.,Kinoshita, E., & Koike, T. (2012). A laborsaving, timesaving, and morereliable strategy for separation of low-molecular-mass phosphoproteins inPhos-tag affinity electrophoresis. International Journal of Chemistry, 4(5),1.

鼠脑来源Dnmt1磷酸化实验

从鼠脑提取液中纯化得到GST-Dnmt1（1-290）结合蛋白，作为体外激酶实验的反应底物，在SuperSep™ Phos-tag™ 预制胶中检测到了激酶的存在。

The DNA-binding activity of mouse DNA methyltransferase 1 is regulatedby phosphorylation with casein kinase 1delta/epsilon. Y. Sugiyama, N. Hatano,N. Sueyoshi, I. Suetake, S. Tajima, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T.Koike, and I. Kameshita, Biochem. J.,

二维电泳分析hnRNP K磷酸化异构体

小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后，裂解细胞，经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中，一维是IPG 胶，二维是SuperSep™ Phos-tag™ 预制胶，可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。

Characterization of multiple alternative forms of heterogeneousnuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura,K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O.Ohara, Proteomics, Nov 2010; 10(21): 3884-95.

▍▏产品列表

匹配Mini-PROTEAN^® Tetra Cell电泳仪(Bio-Rad Laboratories, Inc.)