【Wako】小鼠胚胎干细胞无血清培养基

【Wako】小鼠胚胎干细胞无血清培养基

小鼠胚胎干细胞无血清培养基


本产品是用于小鼠ES细胞培养的无血清培养基。只需在基础培养基中添加mESF添加物和LIF后即可进行小鼠ES细胞培养。使用时无需添加FBS或血清代替品,同时无需使用饲养层细胞。

▍▏产品
● mESF基础培养基(编号No. 136-17805)
● mESF添加物(编号No. 299-73301)
mESF Supplement A 5 mL×1
mESF Supplement B 5 mL×1(含有0.0078% 2-mercaptoethanol)

▍▏特点
● 无需FBS和血清代替品(无血清培养基)
● 无需饲养层细胞
● 低浓度LIF下也能维持未分化能力

▍▏使用方法
● 往mESF基础培养基全量加入各种mESF Supplement及LIF。
※注:直接将mESF从现在使用中的培养基移出时,成功移植细胞数量有可能性减少。因此,请播种比移植时更多的细胞。此外,若不擅长直接移植,请按照以下顺序进行驯化。
① 播种细胞时,将使用中的培养基与mESF培养基以1:1的比例混合。
② 在后面的移植阶段,将使用中的培养基与mESF培养基以1:3、 1:7的比例混合,依次增加mESF培养基的用量。
 
▍▏小鼠ES细胞D3细胞系的培养
使用本产品培养小鼠ES细胞D3细胞系传代至第5代,观察到细胞形态、细胞繁殖能力、未分化标记物。

▍▏细胞形态
观察到具有小鼠ES细胞特有光泽的细胞集落。


▍▏细胞繁殖曲线

 使用本产品后的繁殖曲线如下图。


培养基组成:mESF基础培养基 + 各mESF Supplement + 1,000 units/mL StemSure® LIF
细胞播种数:7,000 cells/well 
使用骨胶原蛋白涂层处理12孔板


▍▏观察到未分化标记物

各种未分化标记物(Nanog, Sox2, Oct3/4, SSEA-1)呈阳性。


▍▏低浓度LIF下的小鼠ES细胞D3细胞系培养
在低浓度LIF下(250, 500 units/ml)培养了小鼠ES细胞D3细胞系。

▍▏集落形态(ALP染色)·细胞繁殖曲线
细胞形态及细胞繁殖曲线如下图。 

培养基组成:
mESF基础培养基 + 各mESF Supplement + 250 or 500 or 1,000 units/mL StemSure® LIF
细胞播种数:7,000 cells/well 
使用骨胶原蛋白涂层处理12孔板 

▍▏ALP染色阳性集落形成率
任何LIF浓度下的集落ALP染色几乎都呈阳性。

▍▏产品列表

※ 仅供实验使用,不可用于临床诊断。

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