【Wako】重组蛋白检测用亲和标签抗体

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wako 018-22381 014-22383 012-22384 018-23621 012-23624 015-22391 019-22394 010-21861 014-21864 010-21866 011-23091 015-23094 011-23096 017-23211 011-23214 014-23221 018-23224 013-23171 017-23174 010-23181 014-23184 012-20461 018-20463 012-22541 013-23811

FUJIFILM Wako为您准备了DYKDDDDK, 6×His, GFP, HA, MBP, c-Myc, GST,V5融合蛋白提纯、检测用抗体及珠。

▍▏DYK标签：DYKDDDDK

DYK标签是识别DYKDDDDK肽的单抗。可用于检测大肠杆菌、酵母、哺乳动物中的DYKDDDDK标签融合蛋白。

将表达3×DYKDDDDK标签融合蛋白A的质粒转染至HEK293细胞株中，经过24小时培养后，随机选取其中的克隆细胞。将选取的克隆细胞用RIPA缓冲液进行溶解，对所得的细胞溶解液用Western Blot法检测，可检测出3×FLAG标签融合蛋白。

分别用FUJIFILM Wako（克隆号 1E6）（产品编号：018-22381）抗体和A公司抗体进行Western Blot检测。

与A公司抗体相比，FUJIFILM Wako（克隆号 1E6）抗体识别DYKDDDDK的特异性更高。

数据提供：
鹿儿岛大学研究生院医疗牙科综合研究科附属顽固病毒病理控制研究中心分子病毒感染研究领域草野秀一老师

A公司产品和FUJIFILM Wako产品在Western Blot检测中的灵敏度比较

Lane 1: 293T细胞溶解液
Lane 2: 瞬时表达蛋白A-DYKDDDDK的293T细胞溶解液
Lane 3: 瞬时表达蛋白B-DYKDDDDK的293T細胞溶解液
封闭：含5%脱脂奶的TBS-T、4℃，一晚

抗体反应：2小时、室温
发光剂：ImmunoStar® LD
检测：LAS-3000、曝光时间15分

FUJIFILM Wako 1E6-HRP比A公司产品有更高的灵敏度!!

▍▏6×His标签：HHHHHH (6×组氨酸)

可用于检测His(6×组氨酸)标签融合蛋白。克隆不同，识别端的特异性、应用也有所不同。

B公司产品和FUJIFILM Wako产品各克隆号的Western blot检测功能比较

N端His：HEK293T表达的6×His-ProteinZ, 1×105 cells

C端His：Protein P-6×His＋CHO细胞溶解液, 1×105 cells

一抗：1 μg/mL
二抗：抗小鼠IgG抗体, 5000倍稀释液可确认其具有比B公司产品同等甚至更高的灵敏度。

6×His tag抗体选购指南

1. N端的检测中，最强的克隆号是什么？

WB：9C11 IP：9C11, 28-75

2. C端的检测中，最强的克隆号是什么?

WB：9F2 IP：28-75

3. 适用于WB检测中，识别N/C端的克隆号是什么？

9C11

4. 适用于IP检测中，识别N/C端的克隆号是什么？

28-75

5. 可灵活应用于WB/IP的万能型克隆号是哪个？

21-48

6. 适用于WB检测的克隆号是哪个？

9C11

7. 适用于IP检测的克隆号是哪个？

28-75

8. 只识别C端的性价比较高的克隆号是哪个？

9F2

▍▏GFP tag：Green Fluorescent Protein (GFP)

可识别Green Fluorescent Protein (GFP)抗体。GFP是可实时检测目标蛋白局部或细胞、细胞器中的标签蛋白，可应用于各个领域。

▍▏HA tag：YPYDVPDYA

血凝素（HA）来源(98-106 aa)的多肽：抗YPYDVPDYA单抗。

参考数据

抗绿色荧光蛋白, 单抗（012-22541）
抗体浓度：1 μg/mL
抗原量：将100 μL表达GFP重组蛋白的大肠杆菌溶解液进行10倍稀释，并取10 μL进行电泳操作

用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。
抗血凝素，单抗（014-21881）

抗体浓度：0.5 μg/mL
抗原量：对5 ng HA标签重组蛋白进行电泳操作
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

▍▏MBP tag：Maltose Binding Protein

可识别Maltose-binding Protein (MBP)单抗。MBP是对麦芽糖、麦芽糊精具有结合性的蛋白，具有通过与目的蛋白融合，提高表达蛋白可溶性的特点，可简便纯化、检测重组蛋白。

▍▏c-Myc标签：EQKLISEEDL

可识别人c-Myc 来源(410-419aa)多肽EQKLISEEDL单抗。

▍▏GST标签：Glutathione-S-transferase

可识别Glutathione S-transferase（GST）单抗。

参考数据

抗c-Myc, 单抗（017-21871）

抗体浓度：0.25 μg/mL
抗原量：对10 ng c-Myc标签重组蛋白进行电泳操作。
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。
抗谷胱甘肽 S-转移酶, 单抗（013-21851）
抗体浓度：1.0 μg/mL
抗原量：将100 μL表达GTS标签重组蛋白的大肠杆菌溶解液进行10倍稀释，并取10 μL进行电泳操作。

用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

▍▏V5 tag：GKPIPNPLLGLDST

可识别多肽GKPIPNPLLGLDST单抗｡