【Wako】EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂
EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂,可保护细胞外囊泡免受冷冻损伤,以及抑制细胞外囊泡对样品管和枪头等实验耗材的吸附。FUJIFILM Wako还推出了适用于动物体内实验的版本(in vivo用)。
使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS(产品编号:299-77603, 293-77601)从细胞培养上清中提取外泌体时,搭配本品效果更佳。
冷冻保护
反复冻融会使外泌体受损。但储存前在含细胞外囊泡的试管中添加EV-Save™,即可在-80°C下储存细胞外囊泡。
防吸附
在纯化或储存前,往样品中添加EV-Save™,可防止由于实验和储存过程中发生的细胞外囊泡吸附而造成的损失,提高回收率。
■ 使用前
· 本产品用于血清、血浆或杂质较多的样品时,难以获得理想的防吸附效果。
· EV-Save™(in vivo用)(产品编号:050-09461)无法减少因超滤导致的细胞外囊泡损耗。因此,进行超滤时,请选用EV-Save™(产品编号:058-09261)。
· EV-Save™(产品编号:058-09261)含有聚合物。若聚合物会影响后续的实验结果,请勿使用本产品。
▍▏特点
● 保护细胞外囊泡免受冷冻伤害
可在-80°C下储存细胞外囊泡
● 防止细胞外囊泡在培养上清中和纯化后对实验耗材的吸附
细胞外囊泡回收率提升!
● 操作简单,只需往样品中添加本产品即可
▍▏细胞外泌体冷冻保护效果
众所周知,在反复冻融的条件下外泌体会受到损伤1)。下面就来验证添加EV-Save™ 是否能抑制外泌体所受到的损伤。
■ 实验条件
对PS亲和法※1 对应试剂盒纯化得到的COLO201细胞来源外泌体进行冻融。然后,使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)(产品编号:297-79201)进行检测(A),以及使用透射电子显微镜(TEM)进行分析(B)。
※1 利用磷脂酰丝氨酸(PS)结合分子以金属离子依赖性方式捕获细胞外囊泡后,用螯合剂洗脱的方法。通过MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS Ver.2,可利用此方法纯化EV。
冻融后CD63信号减弱,但是添加 EV-Save™ 后这种减弱的情况得到抑制 (图A)。此外,电子显微镜分析结果表明冻融导致了粒子数明显减少,但是添加EV-Save™ 可以起到抑制粒子数减少的作用(图B)。
参考文献
1)Steffi, B. et al. "Trehalose prevents aggregation of exosomes and cryodamage", Scientific Reports, 6, 36162 (2016).
▍▏EV-Save™细胞外囊泡保存稳定剂(动物体内实验用)
■ EV-Save™(in vivo用)与EV-Save™ 的比较
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