【Wako】EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂

【Wako】EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂

EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂,可保护细胞外囊泡免受冷冻损伤,以及抑制细胞外囊泡对样品管和枪头等实验耗材的吸附。FUJIFILM Wako还推出了适用于动物体内实验的版本(in vivo用)。

使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS(产品编号:299-77603, 293-77601)从细胞培养上清中提取外泌体时,搭配本品效果更佳。

冷冻保护

反复冻融会使外泌体受损。但储存前在含细胞外囊泡的试管中添加EV-Save™,即可在-80°C下储存细胞外囊泡。

防吸附

在纯化或储存前,往样品中添加EV-Save™,可防止由于实验和储存过程中发生的细胞外囊泡吸附而造成的损失,提高回收率。

■ 使用前

· 本产品用于血清、血浆或杂质较多的样品时,难以获得理想的防吸附效果。

· EV-Save™(in vivo用)(产品编号:050-09461)无法减少因超滤导致的细胞外囊泡损耗。因此,进行超滤时,请选用EV-Save™(产品编号:058-09261)。

· EV-Save™(产品编号:058-09261)含有聚合物。若聚合物会影响后续的实验结果,请勿使用本产品。

▍▏特点

● 保护细胞外囊泡免受冷冻伤害

可在-80°C下储存细胞外囊泡

● 防止细胞外囊泡在培养上清中和纯化后对实验耗材的吸附

细胞外囊泡回收率提升!

● 操作简单,只需往样品中添加本产品即可


▍▏细胞外泌体冷冻保护效果

众所周知,在反复冻融的条件下外泌体会受到损伤1)。下面就来验证添加EV-Save™ 是否能抑制外泌体所受到的损伤。 

■ 实验条件

对PS亲和法※1 对应试剂盒纯化得到的COLO201细胞来源外泌体进行冻融。然后,使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)(产品编号:297-79201)进行检测(A),以及使用透射电子显微镜(TEM)进行分析(B)。

※1 利用磷脂酰丝氨酸(PS)结合分子以金属离子依赖性方式捕获细胞外囊泡后,用螯合剂洗脱的方法。通过MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS Ver.2,可利用此方法纯化EV。


冻融后CD63信号减弱,但是添加 EV-Save™ 后这种减弱的情况得到抑制 (图A)。此外,电子显微镜分析结果表明冻融导致了粒子数明显减少,但是添加EV-Save™ 可以起到抑制粒子数减少的作用(图B)。

参考文献

1)Steffi, B. et al. "Trehalose prevents aggregation of exosomes and cryodamage", Scientific Reports, 6, 36162 (2016).


▍▏EV-Save™细胞外囊泡保存稳定剂(动物体内实验用)

■ EV-Save™(in vivo用)与EV-Save™ 的比较

 
■ 应用数据
· 外泌体的冷冻保护效果
添加EV-Save™ 和EV-Save™(in vivo用)至PS亲和法纯化的COLO201细胞来源外泌体中,冻融1次或3次。然后用PS Capture™ Exosome ELISA Kit(链霉亲和素HRP)(产品编号:298-80601)检测样品管内的外泌体量。
结果显示,在不添加EV-Save™的情况下,冻融会使外泌体标记CD9信号下降,但添加EV-Save™和EV-Save™(in vivo用)后可抑制CD9信号下降。 
· 抑制外泌体的吸附作用
添加EV-Save™和EV-Save™(in vivo用)至PS亲和法纯化的COLO201细胞来源外泌体中,在4℃下存放16 h。然后,使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit(链霉亲和素HRP)(产品编号:298-80601)检测样品管内的外泌体量。
结果显示,在不添加EV-Save™的情况下,外泌体量(CD9信号)下降,但添加EV-Save™和EV-Save™(in vivo用)后可抑制下降。

▍▏产品列表
※ 仅供实验使用,不可用于临床诊断。

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