【Wako】核酸染色试剂选择方法
即使为同一目的所用的试剂种类繁多,同一物质也会有不同的浓度、纯度、规格。
因此,经常有研究人员向我们问到“不知道哪一种适合自己的实验”等。
为了解决这样的问题,接下来将介绍一些正确区分使用FUJIFILM Wako品牌试剂的方法。
核酸染色试剂
核酸染色试剂是用于可视化凝胶中的核酸、分析电泳分离后核酸的试剂。溴化乙锭是一种广泛用于核酸染色的染色试剂。但是,溴化乙锭被指出具有致突变性,应谨慎使用。最近,研究人员也开发了安全性高的新型核酸染色试剂。FUJIFILM Wako可提供溴化乙锭,以及及安全性高的SAFELOOK™系列等核酸染色类产品。
核酸染色试剂原理
用作核酸染色试剂的化合物,具有通过与核酸结合增强荧光强度的特性。常用的溴化乙锭 (Ethidium Bromide/EtBr) 通过插入DNA双链(也可与单链核酸结合),可将荧光强度提高约20倍。因此能够特异性检测核酸。
图1. EtBr结构图
核酸染色试剂常用的化合物除溴化乙锭之外、还有4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole/DAPI)、碘化丙啶(Propidium Iodide/PI)和吖啶橙(Acridine Orange/AO)等。
致突变性
由于核酸染色试剂具有与核酸结合的特性,因此可能会诱导突变。实际上,在进行Ames测试时就发现了溴化乙锭具有致突变性1),处理时需谨慎小心。
FUJIFILM Wako提供的SAFELOOK™系列产品,已在Ames测试中确认致突变性低,可放心使用。
1) Huang, Qing, and Wei-Ling Fu. "Comparative analysis of the DNA staining efficiencies of different fluorescent dyes in preparative agarose gel electrophoresis." Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (CCLM) 43.8 (2005): 841-842.
选择染色方法
琼脂糖电泳中的核酸染色有预染色、后染色和上样添加染色三种方法。每种方法的优缺点总结如下。
核酸染色试剂的特点
产品列表
低致突变性核酸染料SAFELOOK™
溴化乙锭
※ 仅供实验研究用,不可用于临床诊断。
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