【Wako】人ES/iPS细胞无饲养层无血清培养基——StemSure® hPSC培养基△

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本产品是一款可在无饲养层条件下维持培养人多能干细胞（人ES细胞和人iPS细胞）的无血清培养基。由于原材料中不含动物来源成分，以及BSA和HSA等白蛋白，所以无批间差异，可实现稳定培养。但本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）。

特点

● 可在无饲养层条件下培养人ES细胞以及人iPS细胞的无血清培养基

● 每批次都使用人iPS细胞201B7株进行质量检测

● 不使用动物来源成分

● 非药用毒物及剧毒物，易于处理和储存。

● 不含白蛋白的低蛋白培养基

● 可与Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin等多种涂层剂联用

● 可与Accutase，TrypLE Select等解离液联用

● 传代时可通过添加Y-27632实现使用单细胞传代

测试项目

● 细胞增殖测试（使用人iPS细胞201B7株）

● 碱性磷酸酶染色（使用人iPS细胞201B7株）

● 无菌测试

● pH

● 渗透压

● 内毒素

● 支原体测试

使用注意事项

本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）。

本产品需冷冻（-20℃）储存。溶解后不可再次冷冻，建议在2~10℃条件下进行储存，并在1周内使用完毕。

人iPS细胞201B7株的培养

将使用A公司培养基（含BSA、无饲养层用）培养的人iPS细胞201B7株移植至StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。

细胞形态

在StemSure® hPSC培养基Δ中培养的人iPS细胞的细胞形态与A公司培养基培养的几乎相同，也没有观察到趋向分化的形态，可实现稳定培养。

细胞群倍加数

移植到StemSure® hPSC培养基Δ后，立即进行第1~5次传代。结果显示，StemSure® hPSC培养基Δ培养的细胞增殖情况更为良好。

<培养基组成>

StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/mL bFGF

<细胞接种数>

1×10⁵ cells/well （使用6孔板）

未分化性能维持的确认

使用StemSure® hPSC培养基进行5次传代维持培养，确认到全部未分化标志物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）的表达。

※ BC2LCN是一种对存在于人ES细胞/人iPS细胞膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素。

＜数据提供独立行政法人产业技术综合研究所干细胞工程研究中心小沼泰子老师、伊藤弓弦老师＞

人ES细胞WA01株的培养

将使用A公司培养基（含BSA、无饲养层用）培养的人ES细胞WA01株移至StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。

细胞形态

使用A公司培养基进行培养时，在2次传代以后开始出现趋向分化形态的细胞。但使用StemSure® hPSC培养基Δ培养的人ES细胞没有观察到趋向分化的形态，可实现稳定培养。

细胞群倍加数

移植到StemSure® hPSC培养基Δ后，立即进行第1~5次传代。结果显示，与A公司培养基相比，细胞的增殖能力没有差异。

<培养基组成>

StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/mL bFGF

<细胞接种数>

1×10⁵ cells/well （使用6孔板）

未分化维持的确认

使用StemSure® hPSC培养基Δ进行6次传代维持培养，确认到全部未分化标志物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）的表达。

＜数据提供独立行政法人产业技术综合研究所干细胞工程研究中心小沼泰子老师、伊藤弓弦老师＞

染色体核型分析

核型分析使用StemSure® hPSC培养基Δ进行27次传代培养的人iPS细胞，确认是否存在染色体异常。

＜数据提供独立行政法人国立成育医疗研究中心研究所再生医疗中心三浦巧老师、阿久津英憲老师＞

人iPS细胞201B7的三胚层分化

使用StemSure®系列的培养基驯化培养了使用StemSure® hPSC培养基Δ培养的人iPS细胞201B7株。胚状体形成后，通过检测βⅢ-Tubulin、α-SMA、AFP的表达确认三胚层分化。

<培养基组成>

StemSure® D-MEM + StemSure® Serum

Replacement+2 mmol/l L-Glutamine+

0.1 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoetanol+ 1

x Non-essential Amino Acids Solution

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※ 仅供实验研究用，不可用于临床诊断。

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发布日期：2024-04-26 15:32:57
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