【Wako】蛋白磷酸化Phos-tag™ 产品系列(高分期刊文献引用)

【Wako】蛋白磷酸化Phos-tag™ 产品系列(高分期刊文献引用)

Phos-tag™ SDS-PAGE通过电泳,根据磷酸化水平不同,可分离磷酸化和非磷酸化蛋白。分离后凝胶可用于染色、Western blotting和质谱分析(MS)等后续实验。Phos-tag™ SDS-PAGE凝胶,只需在配胶过程中加入Phos-tag™ 分子与Acrylamide结合而成的Phos-tag™ Acrylamide 和二价金属(MnCl2或ZnCl2)即可进行实验。

原理

特点

 产品应用与氨基酸残基的种类和位置无关
・ 可用于未知磷酸化蛋白的磷酸化分析 
・ 可用于检测新的磷酸化位点
磷酸化位点具有不同数目和位置的磷酸化形式也可以分离
・ 可以确定磷酸化水平,以及磷酸化形式的数量
同时检测磷酸化和非磷酸化蛋白
・ 可以定量多种磷酸化形式 
・ 轻松判断有无磷酸化现象发生
无放射性和特殊仪器需求(有SDS-PAGE相关试剂和设备即可)
・ 实验简便且低成本
电泳后可进行WB,MS以及二维电泳分析
・ WB:结合内参进行蛋白分析
・ MS:确定不同磷酸化形式的磷酸化位点组合
・ 二维凝胶电泳:具有相同等电点或分子量的磷酸化形式也可以进行分离

广泛应用

应用案例

~α-casein 随时间变化的去磷酸化反应~
α-casein经过碱性磷酸酶处理,将去磷酸化处理的样品,通过Phos-tag™ SDS-PAGE或常规SDS-PAGE检测其随时间的变化(温育时间:0-120 min)。

WB实例

样品:大鼠脑提取液
检验:抗p35抗体 
条带1:孵育前的大鼠脑提取液 
条带2-5:用MC或ATP孵育(+),未孵育(-) 
*Microcystin:微囊藻毒素(一种磷酸酶抑制剂)
【数据提供】
理化学研究所 脑科学综合研究中心 细川智永 老师
[1] Quantitative Measurement of in vivo Phosphorylation States of Cdk5 Activator p35 by Phos-tag SDS-PAGE 
[2] T. Hosokawa, T. Saito, A. Asada, K. Fu kunaga, and S. Hisanaga Mol. Cell. Proteomics , Jun 2010; 9: 1133 - 1143.


产品列表

Phos-tag™ Acrylamide
预制胶(匹配Bio-Rad伯乐电泳仪)
※ 仅供实验研究用,不可用于临床诊断。

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