【Cellntec】Cellntec产品使用注意事项及角质形成细胞的分化

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角质形成细胞 Keratinocyte Differentiation CnT-Prime Fibroblast Proliferation Medium Cellntec CnT-PR CnT-PR-D

小白求助前辈指路

角质形成细胞的分化不成功、实验做不出来怎么办？新手小白迫切求助，希望各位前辈在文章下方留言，分享自己的经验，为小白们答疑解惑！

产品使用注意事项

1.在常规扩增过程中，传代方案是一个重要的考虑因素。请按照您使用的扩增培养基推荐的种植密度进行种植，并确保在细胞达到100%密度之前进行传代。

2.推荐使用Accutase来分离细胞，因为比胰蛋白酶更温和，不需要单独的试剂来停止反应（分离后立即用培养基稀释），并且在有效分离细胞和细胞过度消化和损伤之间有更大的安全时间窗口。Accutase对热敏感，必须存储在4°C。不需要预热Accutase来分离细胞。暴露于较高温度或重复加热/冷却循环可能会导致其活性降低。

角质形成细胞的分化

（Keratinocyte Differentiation）

CnT-Prime medium (CnT-PR)是一种祖细胞靶向（PCT）培养基，其中包含额外的因子，改善增殖和寿命。

PCT因子可以延缓分化过程。因此，建议在细胞诱导分化时切换到CnT-PR-D分化培养基。此外，细胞密度和钙浓度对于分化很重要。

基于上述情况，建议使用以下方案诱导在CnT-Prime培养基中生长的角质形成细胞进行终末分化：

1.用CnT-PR培养角质形成细胞，直至增殖至细胞密度接近融合状态。

2.在接近融合的前一天，将培养基更换为CnT-PR-D。

3.在细胞密度达到融合状态时添加1.2 mM的Ca2⁺，以促进分化。

由于CnT-PR和CnT-PR-D配方的相似性，细胞可以很容易地在这些培养基之间切换。

在达到细胞密度后，细胞将在24小时内开始分化。分化过程将继续进行7-10天。

表 1 Keratinocyte Differentiation材料