【Promega】小麦胚芽提取物和兔网织红细胞裂解系统
Wheat Germ Extract
描述
Wheat Germ Extract(WGE) 是一种经过良好加工和优化的小麦胚芽提取物。它含有蛋白质合成所必需的细胞成分 (tRNA、核糖体以及起始、延伸和终止因子 )。该提取物通过补充能量再生系统(磷酸肌酸 / 磷酸肌酸激酶)和亚精胺,以刺激链延伸的效率。
只有添加外源氨基酸和 mRNA 才能启动翻译。醋酸钾可用于优化多种 mRNA 的翻译。
反应原理
Wheat Germ Extract 是 Rabbit Reticulocyte Lysate(RRL)系统的有用替代物,用于表达小蛋白或表达可能在 RRL 中含量丰富的蛋白。目前从植物、酵母或其他真菌中表达蛋白质的研究人员,也可能发现 Wheat Germ Extract 比 RRL 更合用。
功能和优点
• 优化提取:帮助表达在 RRL 中表达不好的真核 mRNA。
• 灵活:提供三种氨基酸混合物,可选择不同的放射性同位素。
• 强健:提供醋酸钾可增强多种 mRNA 的翻译。
• 方便:包括萤光素酶阳性对照 RNA。
Rabbit Reticulocyte Lysate System,Untreated
描述
Rabbit Reticulocyte Lysate (RRL), Untreated,含有蛋白质合成所需的细胞成分(tRNA、核糖体、氨基酸、起始、延伸和终止因子),但未经微球菌核酸酶处理。未经处理的裂解物主要用于分离这些成分,并作为内源性珠蛋白 mRNA 的丰富来源。未经处理的裂解物以与经处理裂解物相同的方式从新西兰白兔制备,不同之处在于裂解物未经微球菌核酸酶处理。
注:Rabbit Reticulocyte Lysate (RRL), Untreated,未补充 tRNA、磷酸肌酸、磷酸肌酸激酶、DTT、乙酸钾、氯化镁或氯化血红素。
当补充氯化血红素(最终浓度为 20µM)时,Rabbit Reticulocyte Lysate, Untreated 从添加的 mRNA 模板中合成蛋白质的速度与 Rabbit Reticulocyte Lysate (RRL), Nuclease-Treated 的速度大致相同,持续 60 分钟。未经处理的兔网织红细胞裂解物可通过操作说明 TM232 中列出的成分进一步优化。
特点
• 含有蛋白质合成所需的 tRNA、核糖体、氨基酸、起始、延伸和终止因子,主要用于分离这些成分,并作为内源性珠蛋白mRNA 的丰富来源。
• 无微球菌核酸酶处理。
• 每个批次的网织红细胞产量一致。
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