【Promega】糖原检测:Glycogen-Glo™ Assay

【Promega】糖原检测:Glycogen-Glo™ Assay

Glycogen-Glo™ Assay


●灵敏度 <1μg/ml       ●2 步法       ●高通量

Glycogen-Glo™ Assay 是一种快速、灵敏的检测样本中糖原的方法。该方法可帮助您在同一孔中制备样本并读取数据,而无需额外的进行细胞收集、离心或使用离心柱。Glycogen-Glo™ Assay 基于生物发光法,可以检测糖原的合成,储存和分解的微小变化。

检测原理

Glycogen-Glo™ Assay 利用了一系列酶偶联反应。首先,糖原被糖化酶消化成葡萄糖。然后使用葡萄糖脱氢酶结合生物发光 NADH 检测技术检测产生的葡萄糖,最终产生与样品中起始糖原浓度成比例的发光信号。

如何计算糖原浓度

同时含有糖原和葡萄糖的样品需要两个反应来确定糖原浓度。一个反应检测由消化糖原产生的总葡萄糖加上样品中存在的任何葡 萄糖。第二个反应检测消化前样品中存在的任何葡萄糖。两个反应之间的信号差异代表样品中糖原的产生。糖原有效消化为葡萄 糖单体(≥70%)简化了数据解析和计算。

产品特点

检测样本类型:细胞裂解物、培养基样品、组织匀浆;

检测糖原微小变化:灵敏度 <1µg/ml; 线性范围,最高检 测 20ug/ml 的糖原, 最低检测限小于 20ng/ml,最大检测 窗口 (S/B) >250;

适用于高通量筛选:兼容 96 和 384 孔板。

操作步骤

监测细胞中糖原的消耗和积累

用于 Glycogen-Glo ™ Assay 检测的细胞裂解物制备十分简单,可以很方便的在孔板中进行。首先除去培养基,在用酸(HCl) 裂解之前用 PBS 洗涤细胞三次。图 A. 饥饿时细胞消耗糖原。总共 12500 个细胞在含有 25mM 葡萄糖的培养基或含有 0mM 葡萄糖的饥饿培养基中生长过夜。图 B. 饥饿的细胞在葡萄糖存在下积累糖原。将细胞饥饿过夜,收集细胞,然后在含有 0 或 10mM 葡萄糖的培养基中培养 24 小时。

产品信息

检测标志物

产品

规格

糖原

Glycogen - Glo™ Assay

5ml

50ml


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