【Promega】Kinase-Glo® Luminescent Kinase Assays

【Promega】Kinase-Glo® Luminescent Kinase Assays

说明

Kinase-Glo® Luminescent Kinase Assays(Kinase-Glo® 激酶发光检测试剂盒) 是一种均质的非放射性的方法,用于检测激酶反应后溶液中 ATP 的剩余含量来定量地检测纯化激酶的活性。此试剂盒为多孔板检测模式而设计,是自动化高通量筛选 (HTS) 的理想选择。

该方法可以用于分析蛋白质、脂质和糖激酶。整个操作过程只需在激酶的完全反应中加入单一的溶液即可。溶液加入后会产生与 ATP 含量相关的发光信号,而该信号的强弱与激酶的活力成反比。KinaseGlo® 试剂盒产生的 " 辉光型 " 发光信号是由专利技术的萤光素酶(Ultra-GloTM Luciferase) 和独有的缓冲液系统产生的。当在检测时存在激酶反应缓冲液 ( 如 PKA 的反应缓冲液 ) 的情况下,其发光信号的半衰期超过 5 个小时,因此不需用带有进样器的发光检测仪,可以直接进行批量处理。该试剂盒无论在 96 孔板还是 384 孔板分析时都有非常好的 Z'- 值 ( 通常高于 0.7),可以很容易检测到已知的激酶抑制剂,并且产生的 IC50 值与文献所报道的相当。

Kinase-Glo® 检测系统可根据其对 ATP 线性反应的不同进行区分。最初的 Kinase-Glo® 试剂在 10μM 范围内和 ATP 存在线性关系;Kinase-Glo® Plus 试剂在 100μM 范围内和 ATP 存在线性关系;最新的 Kinase-Glo® Max 检测方法在 500μM 范围内和 ATP 存在线性关系,非常适用于 Km 常数高的激酶的 ATP 检测,也适用于筛选不竞争ATP 结合位点的激酶抑制分子。

特点

• 可分析多种激酶:应用范围广,适用于各类激酶 ( 包括脂质、糖和醇激酶 ) 和各类底物 ( 肽、蛋白质、脂质、糖和醇类 )。

• 结果可靠:相比于其它的基于萤光素酶的检测试剂,本试剂盒的发光信号不易受到受试化合物的干扰。该试剂盒无论在 96 孔板还是 384 孔板检测时,都有非常好的 Z' 值 ( 通常高于 0.7)。

• 操作简单:均质检测,所有反应仅在一个孔中进行。

• 无放射性:不产生放射性废物和安全隐患。

• 自动化检测:请浏览 www.promega.com/automethods/ 了解关于自动化方法的信息。

• 可定制或批量订购:要获取更多关于此产品的定制信息,请浏览:www.promega.com/myway/。

• 筛选非 ATP 结合位点抑制物:用 500μM 高浓度 ATP(KinaseGlo® Max assay)。

储存条件:储存于 -20℃。避免反复冻融或者频繁的温度变化。温度的波动将会严重影响产品的稳定性。

发光值和 ATP 含量线性相关。Kinase-Glo® 激酶发光检测试剂盒检测得到的发光值和反应中 ATP 的量呈直接的线性关系。A,Kinase-Glo® Plus 检测。B,Kinase-Glo®Max 检测。Kinase-Glo® 检测法线性范围在 10μM(数据没有显示)。

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