【Promega】ProFluor® PKA Assay和ProFluor® Src 家族蛋白激酶检测试剂盒
ProFluor® PKA Assay
说明
ProFluor® PKA Assay (ProFluor® 蛋白激酶 A 检测试剂盒 ) 可在多孔板模式下检测纯化的蛋白激酶 A(PKA) 的活力,只需 " 加样-混合 - 检测 " 的操作即可。该试剂盒的第一步是一个标准的激酶反应,该反应使用的是系统中提供的、双酰胺罗丹明 110 标记的 PKA 的底物肽。激酶反应之后,加入含有蛋白酶试剂的终止液,它可以既终止激酶反应,同时又能够特异性地从未被磷酸化的 PKA 底物上去掉氨基酸,释放出游离的罗丹明 110,后者产生强荧光。而磷酸化的底物可对抗蛋白酶试剂的消化作用,因此不产生荧光。所以,测定出的荧光强度与蛋白激酶的活力成反比。该试剂盒无论在 96 孔板还是 384孔板检测时都有非常好的 Z' 值 (>0.8),并且易于从其它化合物中区分出已知的 PKA 抑制剂。
特点
• 能够得到可预测的结果:无论在 96 孔板还是 384 孔板检测,Z′值都大于 0.7。
• 受试化合物产生的干扰最小:罗丹明 110 产生的荧光信号比其它受试物产生的荧光信号都高很多。
• 均质检测:简单的加样 - 混合 - 检测步骤减少了实验步骤。
• 无放射性:不产生放射性废物和安全隐患。
• 可定制或批量订购:要获取更多关于此产品的定制信息,请浏览:www.promega.com/myway/。
• 储存条件:将整个试剂盒储存于 -20℃。PKA R110 底物需避光保存。要获得最佳效果,溶液需现配现用。试剂盒组分应在冰上融化并尽可能早的放回 -20℃。PKA R110 底物预装在 100% DMSO 中,因此需要在室温融化。
ProFluor® Src-Family Kinase Assay
说明
ProFluor® Src-Family Kinase Assay(ProFluor® Src 家族蛋白激酶检测试剂盒 ) 可在多孔板模式下检测纯化的 Src 家族激酶的活力( 已经经过检测的有 Src, Lck, Lyn, Fyn 和 Hck),只需 " 加样-混合 -检测 " 的操作即可,尤其适合高通量应用。该试剂盒的第一步是一个标准的激酶反应,该反应使用的是系统中提供的、双酰胺罗丹明 110标记的 Src 家族激酶的底物肽。激酶反应之后,加入含有蛋白酶试剂的终止液,它可以既终止激酶反应,同时又能够特异性地从未被磷酸化的底物上去掉氨基酸,释放出游离的罗丹明 110,后者产生强荧光。
然而,磷酸化的底物可对抗蛋白酶试剂的消化作用,因此不产生荧光。所以,测定出的荧光强度与蛋白激酶的活力成反比。试剂盒中包含了一个对照肽 (AAF-AMC),可在检测那些对磷酸酶可能产生抑制作用的受试化合物时使用。该试剂盒无论在 96 孔板还是 384 孔板检测时都有非常好的 Z' 值 (>0.7),并且易于从其它化合物中区分出已知的Src 家族激酶抑制剂。
特点
• 能够得到可预测的结果:无论在 96 孔板还是 384 孔板检测,Z'值都大于 0.7。
• 受试化合物产生的干扰最小:罗丹明 110 产生的荧光信号比其它受试物产生的荧光信号都高。
• 含有对照肽:使用对照肽 (AAF-AMC) 可以监控蛋白酶活力,降低假阳性。
• 均质检测:简单的加样 - 混合 - 检测步骤减少了实验步骤。
• 无放射性:不产生放射性废物和安全隐患。
• 储存条件:要长期储存,需要把试剂盒储存于 -20℃。Src-Family Kinase R110 底物和对照 AMC 底物要避光保存。避免反复冻融或者暴露于温度经常变化的环境中。这些温度波动会强烈改变产品的稳定性。
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