【Promega】ADP-Glo™ Kinase Assay

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promega V9101 V9102 V9103

ADP-Glo™激酶检测试剂盒含有足够的试剂，在 384 孔模式下进行所列数目的反应，其中一个激酶反应中每个样品分别使用 5μl kinase reaction，5μl ADP-Glo™ Reagent 和 10μl的 Kinase Detection Reagent。

说明

ADP-Glo™ Kinase Assay (ADP-Glo™激酶检测试剂盒) 是一个发光法激酶检测试剂盒，它检测激酶反应中所形成的 ADP；ADP被转化成 ATP，然后 ATP 再被 Ultra-Glo™ 萤光素酶转化成光。发光信号与激酶活性正相关。该试剂盒适合检测化合物对多种纯化激酶活性的影响，使之成为初级筛选和研究激酶作用的选择性的理想工具。

ADP-Glo™激酶检测试剂盒可用于检测几乎任何可生成ADP的酶(比如，激酶或 ATP 酶 ) 的活性，ATP 浓度可高达 1mM。

该试剂盒的操作有两个步骤：1) 在激酶反应后，向其中加入一份与激酶反应体系等体积的 ADP-Glo™ 试剂，使激酶反应终止，并消耗完剩余的 ATP。2) 加入激酶检测试剂，它在使 ADP 转化成 ATP的同时，还使用偶联的萤光素酶 / 萤光素反应来检测新合成的 ATP。

ADP-Glo™ 激酶检测试剂盒具有很宽的动态范围，即使当 ATP到 ADP 的转化率很低的时候，也能产生强信号。该试剂盒产生的假阳性率最低，Z' 值大于 0.8。

特点

• 在 ATP 转化率低时，亦可得到高强度信号：可以检测到更接近于真实生理条件的激酶活性，非常适合于低活性激酶，比如受体酪氨酸激酶。

• 灵敏：对低浓度 ADP 灵敏，因此比其它试剂盒需要更少的酶，节省成本。

• 通用：几乎可用于任何激酶，在实验室内部就能筛选范围更广泛的激酶，减少了对费用昂贵的、外包激酶选择性研究的依赖。

• 准确：可检测多种起始 ATP 浓度；检测到的活性能够真正反映激酶的活性，并得到 IC50S 值，可与放射性检测方法相媲美。

• 可检测宽范围的 ATP 水平：可在 ATP 浓度高达 1mM 时使用，这对于对 ATP 具有高 Km 值的激酶很重要。

• 稳定的发光信号：可以批量进行微孔板操作，无需严格计时的孵育。