【Promega】胰岛素与胰高血糖素检测：Lumit™ Insulin and Glucagon Immunoassays
Lumit™ Glucagon Immunoassay 和 Lumit™ Insulin Immunoassay 采用快速、简便、无清洗的方案，定量测量细胞培养物或胰岛分泌样品中的胰高血糖或胰岛素。只需将 Lumit™ 试剂添加到样品中，孵育并使用标准多孔板发光检测仪读取发光信号。只需70 分钟即可获得结果。Lumit™ Immunoassay 是定量胰岛中激素分泌的理想方法。灵活的分析通量，可缩放至 384 孔板， 用于高通量样品处理。
■ 检测原理
根据其特异性和敏感性选择的胰高血糖素或胰岛素一 抗，被NanoBiT® 萤光素酶的 LgBiT 和 SmBiT 亚基标记。在胰高血糖素或胰岛素的存在下，这些亚基被结合在 一起，以重构活性萤光素酶。加入优化的萤光素酶底 物产生与分析物水平成比例的明亮发光信号。
Lumit™ Glucagon Immunoassay拥有从皮摩尔到纳摩尔的线性范围，可适用于常用的细胞模型和胰岛样本。
■ 产品特点
可扩展和高通量：在96孔或384孔板中进行低体积的分析；不需要预涂层板。
无需清洗：简单的加样 - 混合 - 读取的检测流程。
快速得出结果：开始分析后仅 70分钟即可获得结果。
线性范围宽：皮摩尔至毫摩尔线性范围涵盖了大多数细胞
模型的预期浓度。
发光检测：使用标准板读数光度计；无需专门的仪器或模块。
■推荐的多孔板分析模式
Lumit™ assay 的体系配制是高度灵活的，并且可以根据需要放大或缩小。除上述配制体积外，该试剂可与任何体积 ≥5µl 的样品以适当的体积配制。有关更多信息，请参见说明书 TM682。
应用：检测胰岛细胞胰岛素与胰高血糖素分泌
胰岛素和胰高血糖素是代谢研究中检测的关键分析靶标。这两种激素分别从胰岛 β 和 α 细胞分泌，对调节体内葡萄糖水平至关重要。使用 Lumit™ Insulin 和 Lumit™ Glucagon Immunoassays，能轻松从培养的单层细胞、3D 胰岛细胞和胰岛等模型里检测激素分泌数据。简单的加样 - 检测的操作流程与静态和动态葡萄糖刺激胰岛素分泌（GSIS）实验兼容 ( 包括生物流体灌注实验 )。
生物流体灌注 (Perifusion) 是一种研究激素分泌随时间变化和对连续治疗反应的有效方法，会产生大量样本用于分析。Lumit™ Immunoassays 检测法，避免了繁琐的清洗步骤，让大量样本分析变得更加容易。更快的结果时间可以更快地获得数据，并使您能够继续进行下一个实验。
■ 定量 INS-1 细胞的胰岛素分泌
用Lumit™免疫检测系统监测细胞胰岛素分泌对葡萄糖的反应。
图 A. 在 96 孔板中以不同的细胞 / 孔重复接种 INS-1 细胞用于葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验。60 分钟后，取出 10µl 上清液，用 LumitTM 胰岛素免疫检测系统分析 384 孔板中的样品。误差为 +/-1 s.d。
图 B. 显示了使用 10000 个细胞 / 孔的同一实验的数据，表明随着葡萄糖浓度的增加，胰岛素释放增加。
■ 定量检测小鼠胰岛胰岛素和胰高血糖素的分泌
使用生物流体灌注实验中收集的样本检测胰岛素和胰高血糖素分泌简言之，将 80 个小鼠胰岛放置在生物流体灌注仪器中（Biorep）的三个腔室中。用 2.7mM 葡萄糖处理胰岛，然后用 10mM 葡萄糖与氨基酸混合 物组合。每分钟收集一次灌流液。将每种样品的 10μl 转移到384 孔板的孔中，并检测胰岛素或胰高血糖素。叠加胰岛素和胰高血糖素数据。该 数据由威斯康辛州麦迪逊市威斯康星大学弗吉尼亚医院Hannah Foster 和 Matthew Merrins 博士提供。
■ 使用 Lumit™ Glucagon Immunoassay ，以表征控制 α 细胞胰高血糖激素分泌的复杂调节机制。
详情请参考下面的文献
El, K. et al. (2021) GIP mediates the incretin effect and glucose tolerance by dual actions on α cells and β cells. Sci. Adv. 7, abf1948.
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