【Promega】糖原检测:Glycogen-Glo ™ Assay
由于葡萄糖代谢是细胞功能的核心,减少葡萄糖摄取或增加糖酵解的变化对细胞和生物体都有广泛影响。与多种疾病相关,如糖尿病,肿瘤,炎症等。
Promega 开发的生物发光检测分析,可以快速、灵敏和有选择性地检测包括 3D 培养模型在内的多种生物样品中的葡萄糖、乳酸、谷氨酸和谷氨酰胺等代谢物。同时还有最新的基于 Lumit™ 免疫检测技术的胰岛素和胰高血糖素检测系统。可以更全面的解析相关的生理病理过程。
糖原检测
Glucose Uptake-Glo™ Assay 是一种非放射性的、基于培养板的、均质生物发光检测系统,用于检测哺乳动物细胞的葡萄糖摄取。
■产品特点
△非放射性:与传统放射性方法基于相同原理,但采用发光法检测。
△步骤简单,均质检测:加入2DG后,无需洗涤,所有步骤
都仅需简单地添加试剂。
△灵敏,线性范围宽:试剂盒可以检测 0.5-30μM 2DG6P
低至 5000 个细胞,信号背景比 >3。
△兼容自动化检测:“加样-混合-读数”的简单操作方式可
与自动化高通量工作流程兼容;反应可扩展至 96-和 384
孔板。
△结果可靠,重复性好:得到的Z'因子 >0.5。
■ 检测原理
基于对 2- 脱氧葡萄糖 -6- 磷酸(2DG6P)的检测
■ 和传统放射性方法相比操作更简单、信号背景比一致
上图:对不同数量的 HCT116 细胞,分别应用传统2DG放射性方法或Glucose Uptake-Glo™ Assay 检测葡萄糖摄取。
■安全、更简单(和传统放射性方法相比)
■癌症模型:低氧状态下的葡萄糖摄入
下图:当细胞缺氧时,缺氧条件会将细胞代谢从氧化磷酸化转变为糖酵解。这导致葡萄糖摄取增加。在缺氧条件下生长的 MCF7 细胞(1 %氧气)显示葡萄糖摄取增加(图 A),表明糖酵解速率增加。使用RealTime Glo™ (图 B)和 CellTiter Fluor™ (图 C) 分析,两组细胞在生存能力方面没有显著变化。
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