【Merck & Roche】胶原酶产品详情

●用于细胞/组织分离的胶原酶

胶原酶被广泛应用于科学研究，它可以降解皮肤、血管、肌腱和骨骼中的胶原蛋白，从而分离细胞或组织。根据需要分离的特定细胞或组织类型来选择不同的胶原酶。I 型胶原酶适用于分离脂肪、肺、上皮和肾上腺组织细胞。II 型胶原酶是分离肝脏、甲状腺、骨骼、心脏和唾液腺组织的理想选择。IV 型胶原酶可分解多种组织，V 型适用于胰岛组织分离，将结缔组织分离成单细胞。胶原酶分解法是培养小鼠肾脏、成人和胎儿大脑组织的理想方法。

●用于细胞培养的胶原酶

胶原酶性质温和，使用时无需搅动，在合适的温度和 pH 值条件下就能很好地分离组织。因此它是培养小鼠肾脏、人类成人和胎儿大脑、人类肿瘤和上皮组织的理想选择。

●用作治疗药物的胶原酶

胶原酶在各种临床应用中也发挥着重要作用，包括治疗腰椎间盘和坐骨神经问题、创伤、类风湿性关节炎和骨关节炎。

特定组织的解剖和制备方式对任何组织消化——胶原酶解离的速度和效率都有显著影响。组织供体年龄的差异也可能是长期范围内的主要变化来源。确保钙离子以 5 mM 存在于消化缓冲液中。螯合剂 EGTA 和 EDTA 可通过去除酶稳定性和活性所需的钙离子而严重抑制胶原酶活性。其他抑制物质还有β-巯基乙醇、半胱氨酸和 8-羟基喹啉-5-磺酸盐。新一批具有较高比活性的胶原酶在一定浓度下可引起细胞过度死亡。在这种情况下，应使用较少的胶原酶和/或添加BSA或血清（分别高达 0.5% 和 5-10%）来稳定细胞已实现进一步的消化。

（100g/10103578001）

胶原酶可降解天然胶原蛋白。梭菌蛋白酶，一种胰蛋白酶样酶，以及中性蛋白酶也会降解其他蛋白质。胶原酶可切割三螺旋结构的蛋白，即胶原蛋白。溶组织梭菌产生六种类型的胶原酶，即α、β、γ、δ、ε和λ。这些胶原酶对结缔组织具有活性，并且对明胶的反应性高于胶原。来自溶组织梭菌（Clostridium histolyticum）的胶原酶具有非常强的活性，它在低至4-10°C的温度下可从两端消化胶原蛋白。被广泛应用于分解许多类型的组织（如，肺，心脏，肌肉，骨骼，脂肪组织，肝脏，肾脏，软骨，乳腺，胎盘，血管，脑，肿瘤，脐带），以及制备细胞悬浮液用于建立原代细胞培养系统。当产量、活力和功能性很重要时，推荐使用胶原酶A，已用于制备多种类型的组织细胞，如肝细胞、脂肪细胞、胰岛、上皮细胞、肌肉细胞、内皮细胞等。

通过过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干从溶组织梭菌培养物制备胶原酶B。来自溶组织梭菌的胶原酶是一种胶原分解酶。它与胶原蛋白样物质相互作用，负责将胶原蛋白降解成小肽。广泛用于分解许多类型的组织（如肺，心脏，肌肉，骨骼，脂肪组织，肝脏，肾脏，软骨，乳腺，胎盘，血管，脑，肿瘤）和单一的准备——用于建立原代细胞培养系统的细胞悬浮液。当产量和活力很重要时，建议使用胶原酶B。

胶原酶P是一种特殊的Clostridium histolyticum菌株细胞外培养滤液中制备酶混合物，种研究用生物化学物，生产不遵循US良好生产规范（GMP）规范。来自Chistolyticum胶原酶被用来分解组织，建立原代细胞培养。因为胶原酶P有高胶原活性，特别适合从小鼠和大鼠（功能测试）分离胰岛。制备产物适合从大鼠附睾脂肪垫分离脂肪细胞。

来自溶组织梭菌的胶原酶被广泛用于解聚多种类型的组织（如，肺、心脏、肌肉、骨骼、脂肪组织、肝脏、肾脏、软骨、乳腺、胎盘、血管、脑、肿瘤），以及用于建立原代细胞培养系统的单细胞悬浮液的制备。当细胞表面蛋白的功能性和完整性很重要时，推荐使用胶原酶D。

胶原酶D是通过过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干而从溶组织梭菌的培养物中制备的。

胶原酶 H 是溶组织梭菌培养物经过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干制成的酶混合物。溶组织梭菌产生的胶原酶用于分离组织，以建立原代细胞培养物。胶原酶 H 非常适合于通过胶原酶灌注法从大鼠肝脏中分离肝细胞。该酶制剂还适用于制备大血管内皮细胞等其他类型细胞，以及从大鼠附睾脂肪垫中分离脂肪细胞。

分散酶是一种中性、快速反应、温和的蛋白酶，能将表皮从真皮中完整分离。它还能将培养的上皮细胞从基质中完整分离出来。其可分裂基底膜区，使上皮细胞保持完整。胶原酶是一种分解三螺旋蛋白胶原蛋白的蛋白酶。组织胶原酶分三种类型，它们属于基质金属蛋白酶(MMP)家族。从溶组织性梭状芽孢杆菌中提取的胶原酶具有很强的活性，因为它可在低至4-10℃的温度下，从两端消化胶原蛋白。胶原酶/中性蛋白酶用于从多种不同的组织和器官中制备细胞。

胶原酶降解天然胶原蛋白。中性蛋白酶是一种非特异性的金属蛋白酶。

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