【Merck】PCR/qPCR：核酸扩增相关产品

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Merck D4184-50UN D4184-250UN D4184-1.5KU D9307-50UN D9307-250UN D9307-1.5KU A4464 GTGATATGC GTGATATGC GTGATATGC B0300 D8418 F9037 G5516 76234 M5904 D8276 R7393 R2502 R6501 A7721 A6410 G6751 12032937001 UDGHL-RO 11444646001 D0184 AXYPCR96M2HSC AXYPCR96C AX

JumpStart™ Tag DNA聚合酶

性能优良的抗体封闭tag酶，旨在最小化非特异性扩增，同时提高目标产量。一旦反应温度达到70°C，Tag DNA聚合酶活性恢复，所得PCR显示出更高的特异性和产率。

应用

●对于需要减少非特异性扩增的PCR扩增

●用于多重PCR

●减少引物二聚体

特点:

●热启动酶活化时间短

●酶扩增无偏好性

●目的基因产量高

包装:

包含三个组分: JumpStart Tag 酶,10X Buffer(可选择是否含 MgCl)和 25mM MgCl 用于优化。

状态:液体

特性:热启动

浓度: 2.5units/ uL

颜色:无色透明

运输方式:湿冰

保存温度:-20°C

推荐 Buffer: 1.100mM Tris-HCI (pH 8.3); 500 mM KCl; 60 mM (NH₄)₂SO₄; 1% Triton X-100; 0.01%BSA

推荐添加剂: DMSO、甜菜碱

不推荐添加剂:甘油

dNTP

PCR 合成 DNA 链原料的 4 种碱基。

包装和浓度:

1.DNTP-10: 单独的四管 dATP,dGTP,dCTP,dTTP,浓度10mM

2.DNTP-100 单独的四管 dATP,dGTP,dCTP,dTTP,浓度:100mM

3.D7295: dNTP mix,浓度: 10mM

4.71004-M,浓度: 10mM

使用注意事项: PCR反应中dNTP浓度一般在50~200mol/L。注意4种dNTP的浓度要相等，如果任何一种dNTP的浓度过低。产生错配的几率将会大大增大;如果dNTP大整体浓度过低，则会降低PCR反应中目标产物的量;如果dNTP量过高，则会与Mg²⁺结合，降低Mg²⁺的有效浓度。

M-MLV逆转录酶

货号: M1302

M- MLV逆转录酶从在质粒上表达M-MLV pol基因的Escherichia coli中纯化所得，能够加速dNTP形成磷酸二酷键，从而催化RNA模板整合到互补DNA中。M-MLV逆转录酶是一种将单链RNA、DNA或RNA-DNA杂合体(利用引物)合成互补DNA链的DNA聚合酶。M-MLV可用于一步法RT-PCR反应或合成第一链CDNA。

应用:

●反转录

●合成CDNA

●RT-qPCR

特点

●逆转录酶热稳定性在37°C时活性佳

●可用于制备长达7kb的第一链CDNA

性质:

状态:液体

颜色:无色

运输方式:干冰

保存温度: -20°C

eAMV逆转录酶

货号: A4464

应用:

Enhanced Avian Reverse Transcriptase 可将 RNA 转录

为 DNA，同时显著提升 mRNA 模板合成 CDNA 的效率。这是由于本款增强型 AMV-RT 能够逆转录长链 mRNA 模板，能够有效穿越复杂的二级结构，可以通过一步法 RT-PCR 反应检测低丰度 mRNA。

性能

●对低丰度mRNA具有更高的灵敏度

●在较高温度(高达 65C)下，以优良的转录能力打开 RNA 二级结构

●有效合成全长CDNA，长度可达14.1kb

性质:

状态:液体

颜色:无色

运输方式:干冰

保存温度:-20°C

引物、探针

基于DNA和RNA的分子诊断需要未修饰或标记的寡核昔酸

默克旗下Sigma-Aldrich在定制寡核甘酸合成有着超过30年

的丰富经验，我们的定制化服务可以从一开始就提供寡核苷酸专家的详细技术建议，为分子诊断制造商提供专业支持。

LNA

LNA 锁核酸是一种新型的核酸类似物,包含 2'-0,4'-C 亚甲基桥。该桥锁定在 3'-C 构象中,限制了呋喃核糖环的柔韧性,并将结构锁定为刚性的双环形式。这可以提高热稳定性并增加应用范围。

具有 PCR 引物、qPCR 探针以及其他类型的寡核苷酸形式

锁核酸可用于以下引物或探针:

●Basic PCR primers

●基础PCR引物

●SYBR® Green引物

●双标探针

●分子信标

●LightCycler® 探针

●Scorpions® 探针

适用于以下应用:

●SNP检测

●等位基因鉴别

●病原体检测

●多重检测

●病毒载量测量

●基因表达分析

●基因拷贝检测

还可用于以下序列:

●反义寡核苷酸

●siRNA

●Capture probes

●捕获探针

●Aptamers

优点:

提高热稳定性和杂交特异性

与天然DNA寡核苷酸相比，在中等盐条件下，每次锁定核酸单体取代后，寡核苷酸与其靶标的改良杂交均可将解链温度(Tm)提高多达8°C。增加寡核昔酸中的锁核酸碱基数量会提高Tm。

序列	锁定碱基	Tm*	ΔTm	ΔTm锁定碱基
GTGATATGC	0	29 °C	-	-
GTGATATGC	3	44 °C	15 °C	+5 °C
GTGATATGC	9	64 °C	35 °C	+3.9 °C

(Ugozzoli L,et al, Anal Biochem,324,143 - 152)蓝色:使用锁核酸突变探针(具有3个锁定碱基的16聚体)分析突变型DNA。绿色:使用天然DNA突变探针(25聚体)分析突变型DNA。红色:使用天然DNA突变探针(25聚体)分析野生型DNA。紫色:使用锁核酸突变探针(具有3个锁定碱基的16聚体)分析野生型DNA。

为难以分析的靶标序列提供更简单、更灵活的设计

锁核酸寡核苷酸具有改善的杂交特性，因此其长度更短。具体而言，与长度约为30-40个碱基的DNA寡核苷酸相比，长度为20-30个碱基的锁核酸寡核苷酸能够检测难以分析的靶标序列，如富含AT或GC的区域。

PCR添加剂

ThermaStop™

ThermaStop™是一种可逆热启动试剂，添加剂是一种创新的热启动和冷停止试剂，可增强Ta DNA聚合酶特异性并提高PCR产物产量与热稳定DNA聚合酶相结合。它直接作用于聚合酶，以防止低于50°C的非特异性酶活性。聚合酶活性在60°C完全恢复，但通过冷却反应被ThermaStop™再次抑制将ThermaStop™添加到PCR反应中可提高灵敏度和总产量。

ThermaGo™

ThermaGo™是经过修饰的核酸，ThermaGo™添加剂可通过PCR增强Tag DNA聚合酶特异性，与ThermaStop™添加

剂协同作用，提高Tag保真度可抑制PCR退火和延伸步骤中的错误引发。它提高了实时和终点分析的可重复性。

ThermaSTOP-RT™

其能够在低温下与逆转录酶相互作用，从而以减少导致非特异性产物的错误引发，提高检测灵敏度，以及提高特定CDNA产量，提高高度多重RT-PCR分析的准确性，允许对微量水平的RNA进行准确的定量测定。

KAPA 试剂盒产品列表

货号	产品描述	规格
KK4600	KAPA SYBR FAST, Universal	1X1ml
KK4601	KAPA SYBR FAST, Universal	1X5ml
KK4602	KAPA SYBR FAST, Universal	2X5ml
KK4603	KAPA SYBR FAST, ABI Prism	1X1ml
KK4604	KAPA SYBR FAST, ABI Prism	1X5ml
KK4605	KAPA SYBR FAST, ABI Prism	2X5ml
KK4606	KAPA SYBR FAST, Bio-Rad iCycle™	1X1ml
KK4607	KAPA SYBR FAST, Bio-Rad iCycle™	1X5ml
KK4608	KAPA SYBR FAST, Bio-Rad iCycle™	2X5ml
KK4609	KAPA SYBR FAST, for Roche LightCycler® 480	1X1ml
KK4610	KAPA SYBR FAST, for Roche LightCycler® 480	1X5ml
KK4611	KAPA SYBR FAST, for Roche LightCycler® 480	2X5ml
KK4701	KAPA Probe Fast Uni	1ml
KK4702	KAPA Probe Fast Uni	5ml
KK4703	KAPA Probe Fast Uni	10ml
KK4715	KAPA Probe Fast Uni	50ml
KK4705	KAPA Probe Fast ABI	1ml
KK4706	KAPA Probe Fast ABI	5ml
KK4707	KAPA Probe Fast ABI	10ml
KK4714	KAPA Probe Fast ABI	50ml
KK4709	KAPA Probe Fast BioRad	1ml
KK4710	KAPA Probe Fast BioRad	5ml
KK4711	KAPA Probe Fast BioRad	10ml
KK4716	KAPA Probe Fast ROX Low	1ml
KK4717	KAPA Probe Fast ROX Low	5ml
KK4718	KAPA Probe Fast ROX Low	10ml
KK5603	KAPA2G Fast HotStart ReadyMix	100rxns
KK5601	KAPA2G Fast HotStart ReadyMix	250rxns
KK5608	KAPA2G Fast HotStart ReadyMix with dye	1.25ml
KK5609	KAPA2G Fast HotStart ReadyMix with dye	6.25ml
KK5101	KAPA2G Fast ReadyMix	1.25ml
KK5102	KAPA2G Fast ReadyMix	6.25ml
KK5103	KAPA2G Fast ReadyMix	25ml
KK4650	KAPA SYBR FAST One-Step Universal	1X1ml
KK4651	KAPA SYBR FAST One-Step Universal	1X5ml
KK4652	KAPA SYBR FAST One-Step Universal	2X5ml
KK4660	KAPA SYBR FAST One-Step ABI	1X1ml
KK4661	KAPA SYBR FAST One-Step ABI	1X5ml
KK4662	KAPA SYBR FAST One-Step ABI	2X5ml
KK4670	KAPA SYBR FAST One-Step Bio-Rad iCycler	1X1ml
KK4671	KAPA SYBR FAST One-Step Bio-Rad iCycler	1X5ml
KK4672	KAPA SYBR FAST One-Step Bio-Rad iCycler	2X5ml
KK4680	KAPA SYBR FAST One-Step for Roche LightCycler	1X1ml
KK4681	KAPA SYBR FAST One-Step for Roche LightCycler	1X5ml