【Promega】SSB,大肠杆菌单链 DNA 结合蛋白和RNasin® RNA 酶抑制剂
Single-Stranded DNA Binding Protein
说明
E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein(SSB,大肠杆菌单链 DNA 结合蛋白) 由 4 个相同的 18.9kDa 的亚基组成。它以协同方式与单链 DNA 高亲和性结合,但不与双链 DNA 结合。它还参与体内 DNA 复制及重组。
储存条件:储存于 -20℃。
Topoisomerase I
说明
Topoisomerase I( 拓朴异构酶 I) 是一种从小麦胚芽中分离到的酶,能够消除共价闭合环状 DNA 中的负超螺旋。
储存条件:储存于 -70℃。
RNasin® Plus RNase Inhibitor
说明
RNasin® Plus RNase Inhibitor (RNasin® RNA 酶抑制剂 ) 是一种作为可溶性蛋白在 E. coli 中表达的重组哺乳动物 RNase 抑制剂,可以利用离子交换和疏水层析相结合的方法纯化获得。该蛋白能够抑制真核 RNase( 如 RNase A 和 RNase B) 活性,与人胎盘 RNase 抑制剂相似。RNasin® Plus RNase Inhibitor 经过 RT-PCR 检验,能与AMV、M-MLV 和 ImProm-II™ Reverse Transcriptases 或 Taq 及 Tfl DNA Polymerases 兼容。RNasin® Plus RNase Inhibitor 在 TaqMan®检测中发现也能和定量、实时 RT-PCR 兼容。
与人源的这种蛋白相比,该抑制剂具有更高的抗氧化活性。研究表明来源于人的该蛋白的两个半胱氨酸对氧化非常敏感,并形成二硫键封闭了抑制剂的活性位点。由于天然氨基酸的多样性,RNasin® Plus RNase Inhibitor 不能形成封闭位点的二硫键。此外,还发现这种重组蛋白具有以前从未认识的特性,即在 50℃以上能持续抑制RNase。将 RNasin® Plus RNase Inhibitor 和 RNase 的溶液加热再冷却,不会造成 RNase 活性的恢复——即使溶液温度超过 RNasin® Plus 蛋白的变性温度。因此,RNasin® Plus RNase Inhibitor 能够在加热前、加热中及加热后保护 RNA,即使在 RT-PCR 中第一链 DNA合成温度下亦如此。将溶液置于 70℃,15 分钟,没有观察到 RNase的活性恢复。
特点
• 增强的抗氧化能力:由于天然氨基酸的多样性,RNasin® Plus RNase Inhibitor 不能形成人源蛋白在氧化条件下会形成的封闭活性位点的二硫化物。
• 高纯度:RNasin® Plus RNase Inhibitor 是 E. coli 表达的可溶蛋白,利用离子交换和疏水相互作用层析相结合的方法很容易纯化获得。不需要直接亲和层析。这种方法可产生纯度 >90% 的抑制剂蛋白,无 E. coli RNase 残留。
• 与 RT-PCR 系统兼容:RNasin® Plus RNase Inhibitor 已被证明可与 Access and Access QuickTM RT-PCR Systems、ImProm- IITM Reverse Transcription System 和 Reverse Transcription System 兼容。同样也被证明可与基于 TaqMan® 的 RT-PCR systems 兼容。
• 在 RNA 模板变性过程中保护 RNA:即使在 70℃加热 RNasin® Plus RNase Inhibitor 和 RNase 的混合物 15 分钟,也不会导致 RNA 酶的活性复苏。许多 RT-PCR 操作方法需要在 RT反应前将 RNA 模板在 RT 引物存在时变性 ( 例如 65-70℃,5-10 分钟 ) 以获得最大灵敏度。现在您可以在这一步骤中加入RNasin® PlusRNase Inhibitor。
• 可保护较高温度下的 RT 反应:可在 RT 反应过程中加入RNasin® Plus RNase Inhibitor,与 ImProm-IITM 和 AMV Reverse Transcriptases 等一起在 50℃以上进行反应。在高温下可能存在的 RNase 会失活。
• 可定制或批量订购:从以下网址获得更多关于该产品的定制选项:www.promega.com/myway/。
储存条件:储存于 -20℃。
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