【Promega】一步法(KRX)感受态细胞和菌株 BL21(DE3)pLysS
Single Step (KRX) Competent Cells
说明
Single Step(KRX) Competent Cells(一步法(KRX)感受态细胞)用于进行有效的转化和严格控制的蛋白表达。该菌株集转化和蛋白表达于一体,性能出色,可评估 E. coli. 中的蛋白表达。
转化效率高于 108cfu/μg,类似于其他高转化效率的感受态细胞。
该产品提供的包装规格可直接用于单次 (50μl) 转化。KRX 也能够进行蓝 / 白筛选。
一步法 (KRX) 感受态细胞是一种 E. coli K 细胞株,含有一个由鼠李糖启动子 (rhaBAD) 驱动的 T7 RNA 聚合酶的染色体拷贝,通过T7 启动子对蛋白表达提供灵活控制。相对于 BL21(DE3) 来源的菌株,一步法 (KRX) 感受态细胞在诱导前蛋白表达水平非常低,这一特性适于克隆和表达对 E. coli 有毒性的蛋白。
基因型:[F',traD36,△ompP,proA+B+,lacIq,△ (lacZ)M15]△ompT, endA1,recA1, gyrA96 (Nalr), thi-1, hsdR17 (rk-, mk+),e14- (McrA-), relA1, supE44, △(lac-proAB), △ (rhaBAD)::T7 RNA polymerase.
特点
• 省时:仅需 2 天,你就可以将载体转化至一步法 (KRX) 感受态细胞,然后即可进行蛋白表达。
• 蛋白表达可控:对于整个克隆蛋白的表达过程,一步法 (KRX) 感受态细胞可实现对蛋白编码区域的灵活控制。
• 高产率:蛋白表达产率与在 BL21(DE3) 来源的菌株中表达的蛋白产率相当或更高。
• 蓝 / 白筛选:这是检测重组克隆的简单方法。
Bacterial Strain BL21(DE3)pLysS
说明
Bacterial Strain BL21(DE3) pLysS(菌株 BL21(DE3)pLysS)能够用于基因的高效表达,所表达的基因需位于 T7 启动子下游,并带有核糖体结合位点。BL21(DE3) pLysS 可溶解 λ-DE3,后者含有 T7 噬菌体基因 I,BL21(DE3)pLysS 在 lac UV5 启动子后编码 T7RNA 聚合酶基因。BL21(DE3)pLysS 同时带有 pLysS 质粒,该质粒带有编码 T7 溶菌酶的基因。T7 溶菌酶可降低 T7 启动子后面的目的基因的表达背景,但是不影响 IPTG 诱导产生的蛋白表达水平。
基因型:F-, ompT, hsdSB (rB-,mB-), dcm, gal, λ(DE3), pLysS, Cmr。
特点
• T7 启动子引导的表达:含有可由 IPTG 诱导表达的 T7 RNA 聚合酶基因。
储存条件:储存于 -70℃。
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