【Promega】pCI-neo 哺乳动物表达载体和BL21(DE3)pLysS 感受态细胞

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promega E1841 L1191

pCI-neo Mammalian Expression Vector

说明

pCI-neo Mammalian Expression Vector(pCI-neo 哺乳动物表达载体 ) 携带有人类巨细胞病毒 (CMV) 的即刻早期增强子 / 启动子区域，来促进哺乳动物细胞中插入克隆 DNA 的组成型表达。此载体也带有新霉素磷酸转移酶基因 , 一种哺乳动物细胞的选择性标志物。通过G-418抗性筛选转染细胞，pCI-neo 载体能够用于瞬时或稳定表达。

特点

• 稳定的组成型表达：人类巨细胞病毒 (CMV) 即刻早期增强子 /启动子区域能够产生高度的组成型表达。位于增强子 / 启动子区域下游的 b-globin/IgG 嵌合内含子也能够进一步增加表达。此载体在表达 SV40 大 T 抗原的细胞中维持游离体状态，以实现更高水平的表达。

• 瞬时或稳定表达：新霉素磷酸转移酶基因能够筛选稳定转染的细胞。

• 稳态 mRNA 水平增加：与早期 SV40 多聚腺苷酸信号相比，晚期 SV40 多聚腺苷酸信号可使稳态 mRNA 水平增加 5 倍以上。

• 方便：多克隆位点的存在使 cDNA 的插入更加容易。

• 通用：可通过 T7 RNA 聚合酶启动子进行体外合成转录或在E.coli 中使用 f1 复制启始位点生成单链 DNA。

储存条件：储存于 -20℃。

BL21(DE3)pLysS Competent Cells

说明

BL21(DE3)pLysS Competent Cells（BL21(DE3)pLysS 感受态细胞）能够用于基因的高效表达，所表达的基因需位于 T7 启动子下游，并带有核糖体结合位点。BL21(DE3) pLysS 可溶解 λ-DE3，后者含有 T7 噬菌体基因 I，BL21(DE3)pLysS 在 lac UV5 启动子后编码 T7 RNA 聚合酶基因。BL21(DE3)pLysS 同时带有 pLysS 质粒，该质粒带有编码 T7 溶菌酶的基因。T7 溶菌酶可降低 T7 启动子后面的目的基因的表达背景，但是不影响 IPTG 诱导产生的蛋白表达水平。

每毫升感受态细菌足够用于进行 10 次转化实验。

基因型：F-, ompT, hsdSB (rB-,mB-), dcm, gal, λ(DE3), pLysS, Cmr.

特点

• T7 启动子引导的表达：含有可由 IPTG 诱导表达的 T7 RNA 聚合酶基因。

• 方便：比自行制备感受态细胞省时省力。

储存条件：储存于 -70℃。