【Promega】HaloTag® Flexi® Vectors

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HaloTag® Flexi® Vectors

说明

目前，已有各种针对哺乳动物、大肠杆菌及无细胞蛋白表达系统的 HaloTag® Flexi® Vectors(HaloTag® Flexi® 载体 ) 可选。这些载体与 Flexi® 载体系统具有兼容性，是一种蛋白质编码序列的定向克隆方法，可将上述序列在各种Flexi®载体间转移，快速、有效、高度保真，

这些 Flexi® 载体带有不同的蛋白或肽标签，可进行天然蛋白或融合蛋白的表达，表达出的蛋白可进行蛋白质结构和功能的研究，也可以进行蛋白 : 蛋白相互作用研究。

用于哺乳动物蛋白表达的 HaloTag® Flexi® 载体

右侧表格中所列举的载体最适宜用于哺乳动物蛋白表达。名称中带有“pFC”的载体都已被设计成将 HaloTag® 蛋白标签添加到目的蛋白的羧基末端，名称中带有“pFN”的载体都已被设计成将HaloTag® 蛋白标签添加到目的蛋白的氨基末端。这些载体或者包含全长的人巨细胞病毒 (CMV) 启动子 (pFC14、pFN21)，或者包含经修饰的人巨细胞病毒 (CMV) 启动子 (pFC15、pFC16、pFC17、pFN22、pFN23、pFN24)。经修饰的CMV启动子带有不同的序列缺失，可根据目的蛋白及细胞类型的不同，产生不同的蛋白表达水平。有关蛋白表达水平的一般信息，请查看右侧表格。

用于大肠杆菌和无细胞蛋白表达系统的 HaloTag® Flexi® 载体

pFN18 HaloTag® T7 Flexi® 载体被设计成将 HaloTag® 蛋白加入到目的蛋白的氨基末端，并在大肠杆菌或无细胞翻译系统中提供 T7RNA 聚合酶驱动的蛋白表达。

pFN19 HaloTag® T7 SP6 Flexi® 载体被设计成将 HaloTag® 蛋白加入到目的蛋白的氨基末端，同时在大肠杆菌 ( 低于 pFN18 载体大约 2 到 4 倍的蛋白表达 ) 中提供 T7 RNA 聚合酶驱动的蛋白表达，或者在无细胞翻译系统中提供T7或SP6 RNA聚合酶驱动的蛋白表达。

pFC20 HaloTag® T7 SP6 Flexi® 载体被设计成将 HaloTag® 蛋白加入到目的蛋白的羧基末端，同时在大肠杆菌中提供 T7 RNA 聚合酶驱动的蛋白表达，或者在无细胞翻译系统中提供 T7 或 SP6 RNA聚合酶驱动的蛋白表达。

注意：pHT2载体（Cat.# G8241）已停产，不适合细菌系统的蛋白表达。

体中的 HaloTag® 蛋白的差异比较

HaloTag® Flexi® 载体含有的 HaloTag® 蛋白为 HaloTag® 7，HaloTag® 7 在温度和变性剂方面提供增强的稳定性、更快的标记速度，因而与 pHT2 HaloTag® 载体所含 HaloTag® 2 蛋白相比，它的表达得到了显著的改善。

特点

• 灵活性：可从众多哺乳动物表达载体中选择满足您需要的最佳载体。

• 节省时间：序列能够在载体间有效地转移，使得重组克隆能够被直接利用，减少了浪费在筛选背景克隆上的时间。

• 多用性：可表达哺乳动物、大肠杆菌或无细胞系统中的HaloTag® 融合蛋白。使用 C 端 HaloTag® Flexi® 载体制备 HaloTag® 融合蛋白的方案概要(详细方案，请参见 Flexi® 载体系统技术手册 TM254)