【Promega】pRL 家族和pGL3 萤光素酶报告基因载体

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Promega

promega E2231 E2241 E2261 E2271 E1741 E1751 E1761 E1771

pRL Family of Renilla Luciferase Control Reporter Vectors

说明

pRL 家族是野生型海肾萤光素酶 (Rluc) 报告基因对照载体。

pRL 载体提供组成型表达的海肾萤光素酶，可与一个萤火虫萤光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾萤光素酶的表达为实验的萤火虫萤光素酶报告基因正态化提供内对照值。pRL 载体包含一个编码海肾萤光素酶 (Rluc) 的 cDNA, 这个 cDNA 从珊瑚虫类腔肠动物海肾(Renilla reniformis) 中克隆而来。目前有四个不同的启动子构造。其中 HSV- 胸腺嘧啶核苷激酶启动子 (pRL-TK) 相对较弱，更适用于海肾萤光素酶报告基因载体的中性组成型表达。早期 SV40 增强子 / 启动子区域 (pRL-SV40) 和 CMV 极早期增强子 / 启动子区域 (pRL-CMV)一般提供高水平转录，因此可能不适于作为实验载体带有强调控元件的共报告基因。一般我们建议在将要应用的目标细胞中验证某一个特定共报告基因的性能。除了经过修饰的 Rluc 报告基因外，所有 pRL载体均是从 dam–/dcm– E. coli K 宿主菌株分离而来，这样可以使用对 dam 或 dcm 甲基化敏感的限制性内切酶进行消化。

特点

• T7 启动子紧邻 Rluc 的上游，可在体外合成海肾萤光素酶。

• SV40 late poly(A) 信号序列位于 Rluc 下游，确保转录的终止和mRNA 的多聚腺苷酸化。

• 原核复制起始区和 b- 内酰胺酶基因可进行 pRL 载体在 E. coli 宿主菌株内的繁殖筛选。

• 为了避免 DNA 甲基化，所有 pRL 载体均从 dam–/dcm– E. coli K宿主菌株中分离而来。

储存条件：储存于 -20℃。

pGL3 Luciferase Reporter Vectors

说明

pGL3 Luciferase Reporter Vectors (pGL3 萤光素酶报告基因载体 ) 为定量分析潜在调节哺乳动物基因表达的因子提供基础，它们可以是顺式或反式作用因子。pGL2 萤光素酶报告基因载体的骨架经重新设计成为了 pGL3 系列载体的骨架，提高了表达量，对萤火虫(Photinus pyralis) 萤光素酶的编码区进行修饰，对在被转染的真核细胞中监控转录活性作了优化。此遗传报告基因的检测快速、灵敏，并且可定量。另外，萤光素酶报告基因载体具有多种特性，以帮助了解所研究的假定调控序列的结构特征。

如需了解最先进的报告基因载体和表达特征的最多选择，请参见pGL4 载体系列。

特点

• 易于使用：位于 luc+ 基因 5' 末端的 NcoI 位点允许使用单一的NcoI 位点实现与报告基因融合。

• 灵活：可从位于多克隆位点区的 SmaI 位点插入平端片段于多克隆位点区，然后可以被其它限制性内切酶从两边切下。

• 通用：在紧靠luc+ 基因下游的 XbaI 位点可促进片段插入 mRNA 3’不翻译区或亚克隆萤光素酶基因。

储存条件：载体储存于 -20℃。