【Promega】CytoTox-Glo™ 细胞毒性检测系统和CytoTox-Fluor™ 细胞毒性检测系统
CytoTox-Glo™ Cytotoxicity Assay
说明
CytoTox-Glo™ Cytotoxicity Assay (CytoTox-Glo™ 细胞毒性检测系统 ) 是一种检测死细胞在细胞群中相对数量的发光检测试剂盒。
当细胞膜受损后，细胞内的某一类蛋白酶 ( 死细胞蛋白酶 ) 被释放出来，CytoTox-Glo™ 检测的正是这种酶在细胞外的活性。一种可发光的细胞非渗透性肽底物 (AAF- 氨基萤光素 ) 可用于检测这种蛋白酶。
释放出的氨基萤光素产物被试剂盒附带的 Ultra-Glo™ 重组萤光素酶催化，产生 " 辉光型 " 发光，从而被检测到。该 AAF- 氨基萤光素底物无法穿过细胞膜完好的活细胞，在活细胞群无法产生可检测的信号。
因此，发光的强度与正在经历细胞毒效应的细胞数量成正比。通过加入裂解试剂 ( 试剂盒提供 )，该试剂盒还能够产生出发光信号，该信号与每个培养孔内的细胞总数相关。用总细胞的发光强度减去死细胞的发光强度即可计算出细胞活力，这样做可以将检测数据对细胞数进行归一化处理，并减少了因检测方法本身对实验体系带来的影响而导致的错误结论。该细胞毒性相关的蛋白酶标志物是组成型表达的，在各细胞系之间高度保守，CytoTox-Glo™ Assay 检测系统与其他细胞活力检测方法具有极好的相关性。
特点
• 检测培养物中死细胞的相对数量：均质的 " 加样 - 混合 - 检测 "的操作步骤，加入一种检测试剂就能检测细胞毒性。
• 可区分细胞活性的微小差别：该试剂盒可以产生线性反应曲线，用以区分细胞活力的微小差别，从中等细胞毒性 (100% 到 95%的细胞活力 ) 到强细胞毒性 (5% 到 0% 细胞活力 )。
• 归一化细胞毒性数据：归一化死细胞数数据，使得孔与孔、板与板、以及不同时间的数据更有可比性。
• 裂解全部细胞，检测剩余活细胞的相对数目：细胞毒性的增加与活细胞的减少呈相关性。
• 使数据质量更好：降低假阳性 ( 或假阴性 ) 的统计学概率，生物发光读数稳定，无荧光干扰。
• 储存条件：避光储存于 -20℃。
CytoTox-Fluor™ Cytotoxicity Assay
实验室用。G9260 含有足量的试剂，可在 96 孔板模式下进行 100 次每次 100µl 的检测，或者在 384 孔板模式下进行 400 次每次 25µl 的检测。G9261 含有足量的试剂，可在 96 孔板模式下进行 500 次每次 100µl 的检测，或者在 384 孔板模式下进行 2,000 次每次 25µl 的检测。G9262 含有足量的试剂，可在 96 孔板模式下进行 1,000 次每次 100µl 的检测，或者在 384 孔板模式下进行 4,000 次每次 25µl 的检测。
说明
CytoTox-Fluor™ Cytotoxicity Assay (CytoTox-Fluor™ 细胞毒性检测系统 ) 是一种均质的单溶液荧光检测系统，可检测死细胞在细胞群中的相对数量。该试剂盒检测与细胞毒性相关的一种独特的蛋白酶，当细胞膜受损后，该蛋白酶被释放出来，使用能产生荧光的肽底物 ( 二 - 丙胺酰基 - 丙胺酰基 - 苯丙胺酰基 - 罗丹明 110；bis-AAF-R110) 检测 " 死细胞活性 "。bis-AAF-R110 底物不能跨越活细胞的完整细胞膜，因此在活细胞中没有信号产生。该试剂盒能与Promega 公司的几种发光检测试剂盒或者处于不同波长范围的荧光检测试剂盒配合使用，进行下游多重分析，比如检测 caspase 激活、报告基因表达或者对结合细胞活力进行正交检测。
特点
• 检测培养基中死细胞的相对数目：均质的“加样 - 混合 - 检测”操作方法消除了平行的多孔板处理过程，并节省细胞培养的费用。
• 每个孔中能够得到更多数据：能与 Promega 的几种发光细胞检测试剂盒叠加使用。
• 归一化细胞毒性的下游多重检测数据：死细胞数目的归一化使孔与孔、板与板以及不同时间的检测结果更具可比性。
• 减少测量变异：均质的“加样 - 混合 - 检测”操作方法避免了由于叠加检测而出现的累加误差。
• 储存条件：储存于 -20℃。
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