【Promega】ProFluor® Ser/Thr PPase Assay
ProFluor® Ser/Thr PPase Assay
说明
ProFluor® Ser/Thr PPase Assay(ProFluor® 丝氨酸 / 苏氨酸蛋白磷酸酶检测试剂盒 ) 以多孔板的检测模式分析纯化后的丝氨酸 /苏氨酸蛋白磷酸酶的活性，检测的步骤仅需 " 加样－混合－检测 "。
此试剂盒可用于蛋白磷酸酶 1 (PP1)、PP2A、PP2B 和 PP2C 的测定。
检测起始于采用双酰胺罗丹明 110 (S/T PPase R110 底物 ) 肽作底物的标准磷酸化反应，由于有些化合物可能会抑制磷酸酶反应，所以使用 AMC 作为对照。磷酸化反应完成后，加入含有蛋白酶的终止缓冲液，可以停止磷酸化反应，同时从未磷酸化的底物上去除氨基酸、释放出发荧光的罗丹明 110。然而，磷酸化的底物可对抗蛋白酶的消化作用，因此不能发出荧光。使用该试剂盒检测到的荧光强度与磷酸酶的活力成正比。这种试剂盒无论在 96 孔板还是 384 孔板读数仪上都能够取得良好的 Z' 值 (>0.8) ，可轻松地将其它化合物与已知的磷酸酶抑制剂区分开。
特点
• 可得到良好的结果：无论在 96 孔板还是 384 孔板上都可取得良好的 Z' 值 (>0.7)。
• 待检化合物的干扰最小：罗丹明 110 的荧光信号强于其他测试化合物的荧光信号。
• 含有对照物：同时提供对照物 (AAF-AMC)，可有效减少假阳性率。
• 简化了您的操作：相比于其他复杂的过程，本试剂盒的简单的" 加样－混合－检测 " 步骤使操作变得更轻松。
• 非放射性：不产生放射性废物和安全隐患。
• 可定制或批量订购：要了解更多关于此产品的定制信息，请浏览：www.promega.com/myway/。
• 储存条件：全部组分应储存于 -20℃。S/T PPase R110 底物和AMC 对照底物避光保存。
磷酸肽含量对荧光强度的影响。将非磷酸化S/T PTPase罗丹明R110底物和磷酸化底物以不同比例混合，模拟磷酸酶的不同含量。此图表显示的是消化90分钟后得到的平均RFU值。
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