【Promega】Non-Radioactive Phosphatase Assay Systems
【Promega】Non-Radioactive Phosphatase Assay Systems
Non-Radioactive Phosphatase Assay Systems
说明
Non-Radioactive Phosphatase Assay Systems( 非放射性磷酸酶检测系统 ) 是测定蛋白磷酸酶活性的一个快速、方便、灵活的方法。该系统确定的是游离磷酸的量，是通过反应中形成的钼酸盐 : 孔雀绿 : 磷酸复合物的吸光度值检测出来的。该系统允许使用多种缓冲液组分和多种底物，包括天然的磷酸化蛋白和合成的磷酸肽。丝氨酸 / 苏氨酸磷酸酶分析试剂盒包含化学合成的磷酸肽 RRA(pT)VA ，它是一种与多种丝氨酸 / 苏氨酸磷酸酶 ( 包括蛋白磷酸酶 2A、2B 和2C) 适合的底物。然而提供的磷酸肽不是蛋白磷酸酶 1 的最适底物，因为蛋白磷酸酶 1 对于底物的结构要求十分严格。
酪氨酸磷酸酶分析试剂盒包括两种化学合成的磷酸肽 , END(pY) INASL 和 DADE(pY)LIPQQG，是大多数酪氨酸磷酸酶的底物。使用该系统检测磷酸酶时，有效的磷酸盐测定范围是 100-4,000pmol 。除了可以测定部分纯化的样品和纯化后的样品之外，该系统还可应用于细胞粗提物和组织提取物。对于后者的情况，这些制备物中含有高浓度的磷酸，在测定之前需要使用提供的离心柱，它可以快速去除样品中游离的磷酸盐和其它的小分子量抑制剂。此外，独特的钼酸盐染料添加剂与钼酸盐染料溶液结合使用，可帮助暴露在酸性的钼酸盐染料溶液的蛋白质溶解，单独使用钼酸盐染料溶液时，会引起蛋白沉淀。
储存条件：将试剂盒储存于 4℃。
使用Serine/Threonine Phosphatase Assay System 检测HeLa细胞提取物的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶活性。
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