【Promega】Transcend™ Nonradioactive Translation Detection Systems

【Promega】Transcend™ Nonradioactive Translation Detection Systems

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Promega
promega L5070 L5061

描述

Transcend™ Nonradioactive Translation Detection Systems 可实现对体外合成的蛋白质进行非放射性检测。使用该系统，可在翻译过程期间将生物素化赖氨酸残基掺入至新生蛋白质中，从而避免了利用 [35S] 甲硫氨酸或其他放射性氨基酸进行标记的需要。

反应原理

该生物素化赖氨酸以预先负载的ε标记生物素化赖氨酸 -tRNA复合物(Transcend™ tRNA)的形式添加至翻译反应中，而不是游离氨基酸。在进行 SDS-PAGE 和印迹后，生物素化的蛋白质可通过与链霉亲和素-碱性磷酸酶(Streptavidin-AP)或链酶亲和素-辣根过氧化物酶(Streptavidin-HRP)结合然后再通过比色或化学发光检测方法进行观察。通常情况下，可在凝胶电泳后 3~4 小时内使用这些方法对 0.5~5ng 的蛋白进行检测。其灵敏度与掺入[35S] 甲硫氨酸和凝胶电泳后进行放射自显影检测 6~12 小时内所得到的灵敏度相同。

功能和优点

●灵敏:生物素标签可以检测 0.5-5ng 的翻译蛋白。

●安全:无需处理、储存或处置放射性同位素。

●灵活:可通过比色法或化学发光法观察结果。

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